T-DNA可能随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化.在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代).
⏺ T—DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T—DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为Tl 代)。(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除 ,...
T-DNA 可能随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的
为研究野生型拟南芥抗盐机理,研究人员利用T−DNA插入拟南芥基因组中,得突变体Y。(1)种植野生型拟南芥,将地上部分浸入 菌悬浮液中以实现转化,该菌的T−DNA上需带有抗除草剂基因以便筛选。在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代)。(2)假设所处理植株为T−DNA单拷贝插入,则T1代植株自交后所结种子中具有抗除草...
(6)T-DNA存在于诱导形成的拟南芥突变体植株的DNA中。DNA连接酶可将不同的DNA片段进行连接。因为DNA两条链反向平行,由图示环状DNA外侧链DNA合成方向可判断,DNA扩增过程所选的引物应为B、C,这样可确保被插入的基因片段得到复制。要注意DNA两条单链反向平行,B、C作为引物可保证插入的基因片段优先复制。点评: 本题...
根据题意,要获得转化液,应将(T-DNA)中插入了卡那霉素抗性基因的农杆菌在液体培养基中震荡培养。用稀释至适当浓度的转化液对野生型拟南芥进行转化,(T-DNA)插入导致基因的碱基对序列发生改变,即发生了基因突变,得到突变型拟南芥。(2)分析表中记录可知,突变型拟南芥自交子代卡那霉素抗性:卡那霉素敏感=3:1,可判断...
拟南芥T—DNA插入突变纯合体的实验中,T-DNA是根癌农杆菌Ti质粒上的一段DNA序列,它能稳定地整合到植物基因组中并稳定地表达。T—DNA在植物中一般都以低拷贝插入,多为单拷贝。单拷贝T-DNA一旦整合到植物基因组中,就会表现出孟德尔遗传特性,在后代中长期稳定表达,且插入后不再移动,便于保存。请结合你所学的知识,...
T-DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代)。(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除 ,因为后者产...
解析 答:确定拟南芥基因组T-DNA插入位点的试验操作如下: (1)提取拟南芥基因组; (2)PCR法和Southern法检测突变体T-DNA插入; (3)采用Tail-PCR方法扩增突变体T-DNA插入位点的侧翼序列; (4)DNAstar软件分析,得到相应的测序结果,分析T-DNA边界剪切位点,与拟南芥基因组数据库比对,确定T-DNA的插入位点。
一．熟练掌握植物基因组DNA快速提取的方法;二．掌握利用PCR方法鉴定拟南芥T-DNA插入 突变体的方法,T-DNA插入鉴定的原理 突变体鉴定的步骤 1.T-DNA插入基因的基因组序列;2.T-DNA插入方向的确定;3.T-DNA插入位置的确定;4.引物设计;5.PCR扩增;6.电泳检测,T-DNA插入基因的基因组序列 点击基因编号进入网页 点击...