比如 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCB...
两步法的话，第一步就不用基因特异引物，直接用oligo dt引物（或者oligo dt+随机引物），反转录得到的整套cDNA模板，也就包括了目的基因模板。第二步，再用Primer5.0设计特异引物扩增就行了。
primer premier 6和oligo结合使用
引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。
如何设计miRNA的RT引物和定量PCR的检测引物 ？
如何设计miRNA的RT引物和定量PCR的检测引物 ？
设计定量引物，像actin，他是一个大家族，有很多成员，每个成员按理说也是有特意性，在不同组织表达量...