解析 建议到UCSC genome browser上看,那里每个基因的extron 用大写字母表示,而Intron用小写字母。比较直观。设计引物建议用软件,比较好的免费网页有Primer3. 至少要有一个引物是跨intron extron交界点。这样可以保证不会扩增残留的DNA。只扩增cDNA。反馈 收藏 ...
一、常规PCR PCR是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,其中引物的好坏与PCR结果有密切关系。PCR不仅要求引物与靶DNA特异结合,还要求DNA聚合酶能对引物进行有效的延伸(图1)。 图1 PCR实验原理 ◆ 引物设计要遵循以下原则 ◆ 01.引物长度一般在15-30bp; 02.引物GC含量一般为40%-60%; 03.引物所对...
比如 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCB...
两步法的话，第一步就不用基因特异引物，直接用oligo dt引物（或者oligo dt+随机引物），反转录得到的整套cDNA模板，也就包括了目的基因模板。第二步，再用Primer5.0设计特异引物扩增就行了。
建议到UCSC genome browser上看，那里每个基因的extron 用大写字母表示，而Intron用小写字母。比较直观。设计引物建议用软件，比较好的免费网页有Primer3. 至少要有一个引物是跨intron extron交界点。这样可以保证不会扩增残留的DNA。只扩增cDNA。
primer premier 6和oligo结合使用
我要做的是一个未知基因， 依据已知物种的 对比设计出了引物，做了RT-PCR获得了大约500bp的片段，现在...
引物作为PCR反应的核心组成部分,其设计质量直接影响到实验的成败。本文将详细介绍常规PCR、实时荧光定量PCR(qPCR)、实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)以及ChIP-qPCR和MeRIP-qPCR的引物设计原则和流程。 一、常规PCR PCR是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,其中引物的好坏与PCR结果有密切关系。PCR不仅要求...
请问，T-DNA插入是在ATG前面15 bp处，位于启动子区域，怎样设计RT-PCR的引物来鉴定突变体？我自己想的...
是做果蝇的神经生物学，谢谢大神。