1.确定蛋白质的纯度：SEC测定技术可以快速分离蛋白质和其他杂质，如亚单位、聚合物、寡聚体等，从而确定蛋白质样品的纯度水平。例如，在一项药物研发过程中，研究人员使用SEC技术分析了重组蛋白样品的纯度。结果显示，SEC图谱呈现了明显的峰状分离，蛋白质峰对应的吸光度信号较高，表明样品中存在较高纯度的蛋白质。2....
因此，利用SEC可以进行蛋白纯度鉴定。当经色谱分离后蛋白组分流经检测器时，若只产生一个吸收峰，则说明样品中只包含一种蛋白质，若生成多个吸收峰，则说明含有多种蛋白组分，即除目的蛋白外，还含有其他的蛋白杂质。
蛋白变性SEC分析 SEC(Size Exclusion Chromatography)尺寸排阻色谱是一种高分子量物质分离分析技术,是所有色谱技术中最温和的一种液相色谱,也称为体积排阻色谱、分子筛色谱或凝胶过滤色谱,在蛋白质分离纯化分析中广泛使用。SEC实现蛋白质分离的技术原理是大小不同的蛋白质流经填充多孔球形颗粒的凝胶色谱柱的速度不同。 蛋...
蛋白电泳SEC 蛋白质凝胶电泳和SEC(Size Exclusion Chromatography)尺寸排阻色谱技术都是蛋白质分析中常用的技术方法,二者基于不同的原理可以实现蛋白质组分的分离与纯度鉴定,还可以检测蛋白质的相对分子质量。 凝胶电泳技术可以进一步分为十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、等电点聚焦电泳(IEF)和二维凝胶电泳(...
可以。在体积排阻柱上使用溶解于0.1% TFA/水中的蛋白/多肽标准品。因为高温可能会使蛋白质变性,所以一般不推荐。 如何理解SEC中的死体积? 死体积是指LC系统中流动相的体积。在大多数的分析模式中,死体积等于不与固定相发生相互作用的无保留化合物被洗脱出来所需要的流动相体积。而在SEC 中,分离并不是基于化合物...
SEC 是一种非常有效的蛋白质分析方法，由于温和的分离条件可获得高分辨率分离，因此它可以根据蛋白质样品的真实大小进行分离分析，与其他尺寸分离技术（如超滤或透析）相比，这是一个很大的优势。经色谱柱分离后的蛋白组分通过检测器进行检测可以得到其体积与吸收峰的色谱图，因此还可以用于蛋白的含量分析。SEC可实现蛋白...
sec蛋白家族的功能Sec蛋白家族是内质网膜上的蛋白质通道的重要组成部分,具有将未折叠或不完全折叠的蛋白质转运到内质网腔的功能。如果Sec发生突变,通道的功能可能会受到影响,导致蛋白质不能正常转运到内质网腔。具体而言,在Sec发生突变的酵母中,正常定位在高尔基体中的蛋白可能会发生无法折叠的错误折叠、聚集或者停滞在...
将SEC-MALS 20 系统连接至使用 TDA RI 检测器的 Viscotek TDAmax 系统以测定浓度。 样品沿 2 根 Viscotek 蛋白柱以磷酸盐缓冲液作为流动相进行分离。 所有蛋白质样品均溶解在流动相中。 使用牛血清白蛋白(一种分子量表征良好的蛋白质)校准 SECMALS 20 系统。 使用一系列球状蛋白质(用于分子量为 29,000-700,...
蛋白质分子筛SEC纯度分析 SEC进行蛋白纯化的优点: 1, 可进行缓冲液交换和脱盐。 2, 可分离其他纯化技术难以分离的相似品种(如蛋白片段和低聚物)。 3, 可与多种溶剂相容。 4, 不依赖于蛋白质的任何一种特殊形式进行保留和洗脱。 SEC进行蛋白纯化的缺点: ...
SEC-HPLC进行蛋白纯度分析时出现蛋白粘柱子是因为蛋白与柱填料发生了可逆或不可逆的相互作用,导致峰展宽、拖尾甚至不出峰等现象,影响蛋白的准确定量。为了解决这一问题,可以在流动相中添加减少相互作用的添加剂,例如提高盐浓度、添加精氨酸和有机溶剂等。