1.确定蛋白质的纯度：SEC测定技术可以快速分离蛋白质和其他杂质，如亚单位、聚合物、寡聚体等，从而确定蛋白质样品的纯度水平。例如，在一项药物研发过程中，研究人员使用SEC技术分析了重组蛋白样品的纯度。结果显示，SEC图谱呈现了明显的峰状分离，蛋白质峰对应的吸光度信号较高，表明样品中存在较高纯度的蛋白质。2....
蛋白质SEC的现成校准标准品 校准混合物应包含与分析样品分子相似的分子。尺寸排阻色谱法根据分子的流体动力学大小分离分子，这取决于水合壳的厚度。给定溶剂中的分子水合度由分子特征（如极性）决定。通常，聚乙二醇因其单分散性而用作标准品。用于校准的分子应该每个峰对应于一个分子量。此外，聚乙二醇非常稳定，可以...
蛋白分析常用的紫外检测波长是多少? 蛋白检测最常见的紫外波长是280nm。在此近紫外区,吸收值主要取决于酪氨酸(Tyr)和色氨酸(Trp)的含量,并在一定程度上受到苯丙氨酸(Phe)和二硫键的含量影响 如何为体积排阻色谱(SEC)/凝胶过滤色谱(GFC)选择流动相? 最常见的凝胶过滤色谱应用是蛋白聚集体的分析。此类分析需要保持...
SEC 是一种非常有效的蛋白质分析方法，由于温和的分离条件可获得高分辨率分离，因此它可以根据蛋白质样品的真实大小进行分离分析，与其他尺寸分离技术（如超滤或透析）相比，这是一个很大的优势。经色谱柱分离后的蛋白组分通过检测器进行检测可以得到其体积与吸收峰的色谱图，因此还可以用于蛋白的含量分析。SEC可实现蛋白...
SEC-HPLC是一种基于蛋白质分子大小的分离技术。它利用一个多孔的凝胶柱,较大的蛋白质分子无法进入凝胶内部,因此会在柱上流动速度较快,而较小的杂质分子则能进入凝胶内部,流动速度较慢。通过监测流出柱的吸光度信号,可以得到蛋白质样品的分子大小分布情况,从而评估样品的纯度。 2、准备工作 首先,需要准备好SEC-HPLC...
体积排阻色谱 (SEC) 是治疗性蛋白药物聚集体和片段分析的强大工具1-3。 SEC是一种非保留分离模式,分析物基于自身流体动力学尺寸:由大到小,依次洗脱。 对于治疗性蛋白药物,聚集体在单体之前洗脱,片段在单体后洗脱。 △图1 聚集体、单体和片段依次流出
根据谱峰的数量判断样品包含几个组分。因此，利用SEC可以进行蛋白纯度鉴定。当经色谱分离后蛋白组分流经检测器时，若只产生一个吸收峰，则说明样品中只包含一种蛋白质，若生成多个吸收峰，则说明含有多种蛋白组分，即除目的蛋白外，还含有其他的蛋白杂质。
蛋白电泳SEC 蛋白质凝胶电泳和SEC(Size Exclusion Chromatography)尺寸排阻色谱技术都是蛋白质分析中常用的技术方法,二者基于不同的原理可以实现蛋白质组分的分离与纯度鉴定,还可以检测蛋白质的相对分子质量。 凝胶电泳技术可以进一步分为十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、等电点聚焦电泳(IEF)和二维凝胶电泳(...
sec蛋白家族的功能Sec蛋白家族是内质网膜上的蛋白质通道的重要组成部分,具有将未折叠或不完全折叠的蛋白质转运到内质网腔的功能。如果Sec发生突变,通道的功能可能会受到影响,导致蛋白质不能正常转运到内质网腔。具体而言,在Sec发生突变的酵母中,正常定位在高尔基体中的蛋白可能会发生无法折叠的错误折叠、聚集或者停滞在...
SEC-HPLC进行蛋白纯度分析时出现蛋白粘柱子是因为蛋白与柱填料发生了可逆或不可逆的相互作用，导致峰展宽...