SEC-HPLC进行蛋白纯度分析时出现蛋白粘柱子是因为蛋白与柱填料发生了可逆或不可逆的相互作用，导致峰展宽、拖尾甚至不出峰等现象，影响蛋白的准确定量。为了解决这一问题，可以在流动相中添加减少相互作用的添加剂，例如提高盐浓度、添加精氨酸和有机溶剂等。
1.确定蛋白质的纯度：SEC测定技术可以快速分离蛋白质和其他杂质，如亚单位、聚合物、寡聚体等，从而确定蛋白质样品的纯度水平。例如，在一项药物研发过程中，研究人员使用SEC技术分析了重组蛋白样品的纯度。结果显示，SEC图谱呈现了明显的峰状分离，蛋白质峰对应的吸光度信号较高，表明样品中存在较高纯度的蛋白质。2....
SEC-HPLC是一种基于蛋白质分子大小的分离技术。它利用一个多孔的凝胶柱,较大的蛋白质分子无法进入凝胶内部,因此会在柱上流动速度较快,而较小的杂质分子则能进入凝胶内部,流动速度较慢。通过监测流出柱的吸光度信号,可以得到蛋白质样品的分子大小分布情况,从而评估样品的纯度。 2、准备工作 首先,需要准备好SEC-HPLC...
sec测蛋白纯度 sec测蛋白纯度 尺寸排阻色谱（Size exclusion chromatography，SEC）也称为体积排阻色谱、分子筛色谱或凝胶过滤色谱，是所有色谱技术中最温和的一种液相色谱。SEC根据分子大小差异通过填充在色谱柱中的树脂对其进行分离，这种树脂是一种多孔的球形颗粒，当水溶液样品进入色谱柱时，大小介于孔径之间的分子可以...
五、HPLC纯度检测样本处理过程(SEC-HPLC) 1.系统平衡:使用与样品稀释相同的缓冲液,平衡SEC-HPLC系统,直到基线稳定。 2.加载样品:通过自动进样器或手动方式,将准备好的样品加载到色谱系统中。 3.洗脱和检测:以恒定的流速通过色谱柱,蛋白质将根据其大小依次洗脱,并通过检测器(通常为紫外检测器)记录洗脱曲线。
组蛋白翻译后修饰分析 酰化定量蛋白质组研究 甲基化定量蛋白组学研究 蛋白质SUMO化鉴定 基于Top down自上而下 法的PTMs表征 糖蛋白组学 绝对定量分析(AQUA) 肽纯度分析 DIA定量蛋白质组学 靶向蛋白质组学 S-亚硝基化分析 基于高精度质谱的免疫 蛋白二硫键鉴定和定量分析 磷酸化定量蛋白组学研究 多肽组学分...
通过优化SEC-HPLC方法，我们可以提高蛋白质纯度的测定精度和灵敏度，为蛋白质研究和生物药物开发提供有力支持。1.高效SEC-HPLC的原理 高效SEC-HPLC利用分子筛柱对蛋白质进行分子大小的分离，从而实现对蛋白质纯度的检测。较大分子量的蛋白质会较快地通过柱床，而较小分子量的杂质则会滞留更长时间。通过检测样品中...
SEC作为一种分离分析技术，已广泛应用于各种大分子复合物（如糖、多肽、蛋白质、沥青、丁基橡胶、聚乙烯、聚苯乙烯以及硅聚合物等）的分离以及表征，如摩尔质量分布（Mw）、体积以及含量表征等。通常，通过适当选择合适的凝胶和柱长，可以分离分子量相似的分子。此外还可利用SEC从无机和可电离物质中分离生物来源的大...
在SEC测定中,样品溶液中的蛋白质分子会在柱中形成动态平衡。当样品通过SEC柱时,较大的蛋白质分子会更快地通过柱床,而较小的杂质分子会相对滞留在孔隙中,从而实现纯度的分离。最终,通过检测样品在柱床上的吸光度或荧光信号变化,可以确定蛋白质的纯度水平。 SEC技术的优势🌟 高效性: SEC可以快速、有效地分离蛋白...
纯度SEC检测SEC(Size exclusion chromatography)分子筛色谱也称凝胶过滤色谱或尺寸/体积排阻色谱,是一种最温和、最简单的液相色谱分离技术,在组织提取液、核酸、蛋白质以及多肽等物质的分离纯化中广泛应用。分子筛色谱主要由色谱柱和检测器构成,色谱柱的填充物为多孔的球形颗粒材料,这种材料能起到像分子筛一样的过滤作用...