蓝白斑筛选法可能是使用最为广泛的用来筛选含插入片段的目的菌落的方法,除此以外还有一些其他的筛选方法。有些质粒上编码一个致死基因,克隆片段插入到该基因中的MCS则扰乱该致死基因的表达,理论上可以使存活的菌落均含成功克隆的质粒,例如ccdB基因系统。这和蓝白斑筛选中 肽的DNA干扰相似。抗生素选择同样被与之结合使...
大肠杆菌本身是能够表达β-半乳糖苷酶的(乳酸存在的前提下),所以正常的大肠杆菌无法进行蓝白斑筛选,有乳酸存在的条件下,所有菌落都会分解X-gal产生蓝色。能够用来进行蓝白斑筛选的菌株,我们管之叫作为β-半乳糖苷酶缺陷型菌株。缺陷就意味这不正常。也就是说能够进行蓝白斑筛选的菌株内的β-半乳糖苷酶的表达是不正...
一、蓝白斑筛选的注意事项: 1、实际操作中发现当插入小片段时,重组子也有形成浅蓝斑的情况.即蓝色菌斑也有可能含外源基因; 2、大概有30%的假阴性. 若形成的白斑很多,但仍不是阳性克隆,需仔细检查你的质粒载体和目的片段连接转化时间温度控制好 避免载体自连并且排除你的酶切插入位点等没有出现设计问题; 3、若用...
蓝白斑筛选的判定标准 1. 观察分布情况:蓝白斑应呈现散在分布,非对称生长。边缘清晰,形态多样,单个斑块直径通常在0.5-2 cm范围内。 2. 颜色特征:蓝白斑通常呈现蓝灰色或青白色。色泽均匀或不均匀,有时可能有棕黄色、黑色或红色的斑点。 3. 病变表面:蓝白斑表面一般光滑但可以有微小鳞屑存在。斑块边缘可能呈现...
伍德灯是检查白斑的一种基本设备,临床上也常用这种设备对白癜风进行检查,根据黑色素脱失程度的不同,白癜风在伍德灯下会依次显示灰白色、蓝白色、纯白色、瓷白色,患者的白斑显示蓝白斑片考虑是早期白癜风,建议患者进行更深一步的检查。(伍德灯检查白斑会不会误诊?点我了解) ...
蓝白斑筛选是一种常用的细胞培养技术,用于分离和纯化特定类型的细胞,需要注意选择合适的载体、确定转化效率、观察结果等。 1.选择合适的载体:蓝白斑筛选需要使用一种特殊的载体,即含有lacZ基因的质粒pUC19。这种载体可以通过转化细菌来制备,并将其导入到目标细胞中。在进行蓝白斑筛选之前,需要确保所使用的载体是高质量的...
1、资源共享蓝白斑筛选原理及问题总结1问题:做转化时,用蓝白斑筛选,以获得阳性克隆。那它和直接利用AMP抗性,而不用蓝白斑筛选,有什么区别吗?蓝白斑筛选有什么作用吗?对于这一问题,我想,抗性筛选是防止杂菌生长。理论上说,当培养基中含有抗生素时,只有携带相应抗药性基因载体的细胞才能生存繁殖。蓝白筛选是验证是否有...
蓝白斑筛选法名词解释 嘿,咱今儿个就来讲讲蓝白斑筛选法!这蓝白斑筛选法啊,就像是一个神奇的魔法筛子,能把我们想要的东西给筛出来呢!比如说,你有一堆混杂的东西,就像你在一堆糖果里找你最喜欢的那颗草莓味的,蓝白斑筛选法就能帮你把它找出来。 咱先来说说它的原理哈。它是利用了一种特别的基因,就像一个...
蓝白斑筛选——lacZΔM15 • lacZM15 是表达β-半乳糖苷酶α片断的一段基因, lacZΔM15就是lacZ M15缺失。 • lacZ 基因是大肠杆菌中lac 操纵子的结构基因,表达β-半乳糖苷酶,分解乳糖为半乳糖苷和葡萄糖。β-半乳糖苷酶是由四个相同的亚基组成的,每个亚基又包含两个片断,即α片断和ω片断,只有这两种片...