蓝白斑筛选是什么? 蓝白斑筛查它是一种关于基因发面的筛查,也是重组子筛查的一种,通常蓝白筛查和抗性筛查是一起的,它的原理一般是靠一些载体所带有的编码区,然后构建重组子,对这些重组子的筛查就是蓝白斑筛查。 本内容不能作为治疗依据,如有不适请到医院进行科学治疗...
蓝白斑筛选是达到此目的的一种广泛使用的方法。 01蓝白斑筛选的基本原理 研究较为充分的细菌乳糖操纵子结构包含一个编码 -半乳糖苷酶基因lacZ。lac操纵子结构的表达可受乳糖及其类似物如IPTG的诱导。准确的说,IPTG能结合并失活lac操纵子的阻遏蛋白,从而起始lac操纵子的表达。lac操纵子表达后, -半乳糖苷酶能将显...
这种重组子的筛选,又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后,有重组质粒的细菌形成白色菌落。 设计适用于蓝白斑筛选的基因工程菌为β-半乳糖苷酶缺陷型菌株。这种宿主菌的染色体基因组中编码β-半乳糖苷酶的基因突变,造成其编码的β-半乳糖...
细菌的篮白斑筛选又称α-互补法,是根据组织化学的原理来筛选重组体的方法。指在载体的非必要区插入带有β-半乳糖苷酶N端含145个氨基酸(α肽)的编码序列,并在此编码序列中插入一个多克隆位点区,它不破坏操纵子的阅读框,产生蛋白时只是在β-半乳糖苷酶的氨基端增加几个氨基酸而不影响功能;转化含缺陷型β-半乳糖...
蓝白斑筛选是一种常用的细胞培养技术,用于分离和纯化特定类型的细胞,需要注意选择合适的载体、确定转化效率、观察结果等。 1.选择合适的载体:蓝白斑筛选需要使用一种特殊的载体,即含有lacZ基因的质粒pUC19。这种载体可以通过转化细菌来制备,并将其导入到目标细胞中。在进行蓝白斑筛选之前,需要确保所使用的载体是高质量的...
【题目】 蓝白斑筛选是基因工程中筛选重组目的基因常用的一种方法,表现为培养基上出现蓝白颜色的菌落,可以通过颜色为依据直接筛选重组菌。用于筛选的菌为 β- 半乳糖苷酶 缺陷型菌株,这种宿主菌中编码 β- 半乳糖苷酶的部分缺失,不具有生物活性。用于蓝白斑筛选的质粒载体一般含有抗性基因和将宿主菌 β -半乳糖...
1.基因克隆:蓝白斑筛选能够帮助研究人员快速鉴定克隆中是否含有目的基因,并确定目的基因的定位以及克隆的纯度。 2.蛋白质表达:通过蓝白斑筛选,可以筛选出表达目的蛋白的细胞克隆,从而方便研究人员进行蛋白质的表达和纯化。 3.基因表达调控:蓝白斑筛选可以帮助研究人员研究目的基因的表达调控机制,以及筛选出调控因子。 4....
蓝白斑筛选名词解释 蓝白斑筛选是一种用于检测DNA序列特异性的技术。其原理基于DNA序列中存在的限制性内切酶切割位点,通过引入特定的引物和限制性内切酶,将待检测的DNA样品进行PCR扩增,并在PCR产物中筛选出含有目标DNA序列的片段。 在蓝白斑筛选中,引物通常设计为含有限制性内切酶切割位点的短序列,在PCR反应中与模板DNA...
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法:是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β...