蓝白斑筛选是什么? 蓝白斑筛查它是一种关于基因发面的筛查,也是重组子筛查的一种,通常蓝白筛查和抗性筛查是一起的,它的原理一般是靠一些载体所带有的编码区,然后构建重组子,对这些重组子的筛查就是蓝白斑筛查。 本内容不能作为治疗依据,如有不适请到医院进行科学治疗...
细菌的篮白斑筛选又称α-互补法,是根据组织化学的原理来筛选重组体的方法。指在载体的非必要区插入带有β-半乳糖苷酶N端含145个氨基酸(α肽)的编码序列,并在此编码序列中插入一个多克隆位点区,它不破坏操纵子的阅读框,产生蛋白时只是在β-半乳糖苷酶的氨基端增加几个氨基酸而不影响功能;转化含缺陷型β-半乳糖...
1.选择合适的载体:蓝白斑筛选需要使用一种特殊的载体,即含有lacZ基因的质粒pUC19。这种载体可以通过转化细菌来制备,并将其导入到目标细胞中。在进行蓝白斑筛选之前,需要确保所使用的载体是高质量的、无污染的。 2.确定转化效率:在进行蓝白斑筛选时,需要将含有lacZ基因的质粒pUC19导入到目标细胞中。为了提高转化效率,可...
蓝白斑筛选法可能是使用最为广泛的用来筛选含插入片段的目的菌落的方法,除此以外还有一些其他的筛选方法。有些质粒上编码一个致死基因,克隆片段插入到该基因中的MCS则扰乱该致死基因的表达,理论上可以使存活的菌落均含成功克隆的质粒,例如ccdB基因系统。这和蓝白斑筛选中 肽的DNA干扰相似。抗生素选择同样被与之结合使...
蓝白斑筛选的原理是什么?相关知识点: 试题来源: 解析 利用α互补现象进行筛选,Lacz ’ 基因编码的α肽链同失去了正常氨基末端的 β— 半乳糖苷酶突变体的互补现象称为 α 互补。由α 互补形成的有功能的 β— 半乳糖苷酶能将无色底物X-gal切割成半乳糖和深色的5-溴-4-靛蓝而显色出来。因此,任何携带有Lacz...
【题目】 蓝白斑筛选是基因工程中筛选重组目的基因常用的一种方法,表现为培养基上出现蓝白颜色的菌落,可以通过颜色为依据直接筛选重组菌。用于筛选的菌为 β- 半乳糖苷酶 缺陷型菌株,这种宿主菌中编码 β- 半乳糖苷酶的部分缺失,不具有生物活性。用于蓝白斑筛选的质粒载体一般含有抗性基因和将宿主菌 β -半乳糖...
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可...
1.基因克隆:蓝白斑筛选能够帮助研究人员快速鉴定克隆中是否含有目的基因,并确定目的基因的定位以及克隆的纯度。 2.蛋白质表达:通过蓝白斑筛选,可以筛选出表达目的蛋白的细胞克隆,从而方便研究人员进行蛋白质的表达和纯化。 3.基因表达调控:蓝白斑筛选可以帮助研究人员研究目的基因的表达调控机制,以及筛选出调控因子。 4....
蓝白斑筛选是一种基因工程常用的细菌重组子的筛选方法。野生型埃希氏大肠菌（E.Coli）产生的β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷）切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。5-溴-4-靛蓝可使整个菌落产生蓝色变化。在经人工插入外源基因后，突变型大肠杆菌的β半乳糖苷...