02.实验流程 1、将处理过的细胞胰酶消化后计数,接种1000个细胞至96孔板,每孔100μl培养基,将培养板置37℃,5% CO₂培养箱中培养0 h、24h、48h和72h;2、每孔加入10μl CCK-8溶液,用加了相应量细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照;3、在细胞培养箱内继续孵育0.5h,用酶标仪在450nm测定...
实验流程和操作步骤 01实验分组（每组建议3-6个复孔）实验组：药物或者基因过表达等处理细胞+CCK-8试剂（见下表黄色列）对照组：不加药物等的对照细胞+CCK-8试剂（见下表绿色列）空白组：不加细胞的空白培养基+CCK-8试剂（见下表蓝色列）PBS孔：灰色，防止液体过度蒸发排版参考：02实验方案 1.种板细胞数：细...
8. 拍照时若有沉淀、结晶或较脏,要用PBS洗一遍,加培养基后再加CCK8。 9. 加CCK-8时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,干扰OD值。加CCK-8试剂时速度要快,减少试剂在移液器上的残留,加入CCK-8试剂后轻轻震培养板,为了避免加样时由于CCK-8 残留在枪头或壁上上所带来的误差。
CCK8(Cell Counting Kit-8)细胞增殖实验是一种通过检测细胞存活率来评估不同处理条件下细胞生存状况的实验方法。该实验利用CCK8试剂与细胞内的脱氢酶反应,生成紫色的甲臜产物,其颜色强度与细胞的代谢活跃度和存活率成正比。通过检测450nm波长下的吸光度值,可以间接反映出细胞的增殖情况。 2. CCK8细胞增殖实验所需的...
CCK-8(Cell Counting Kit-8)实验步骤 原理:CCK-8试剂盒中的WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)是一种黄色化合物,它在电子耦合试剂1-Methoxy PMS(1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色...
🔬 CCK8检测细胞增殖的原理:CCK8试剂中的主要成分WST-8能够在细胞内脱氢酶的作用下被氧化还原,生成水溶性的橙黄色甲臜。甲臜的生成量与活细胞的数量成正比,因此可以通过测量甲臜的量来评估细胞的增殖情况。📌 注意事项1️⃣ 接种细胞时,细胞悬液必须充分混匀,以避免细胞沉淀导致每孔中的细胞数量不一致。通常...
一、CCK8实验:细胞增殖研究的得力助手 CCK8实验是一种简便而准确的细胞增殖和毒性分析方法。它利用一种特殊的试剂,通过检测细胞代谢产生的活性物质来评估细胞的增殖情况。与传统的细胞增殖实验方法相比,CCK8实验无需洗涤细胞,无需使用放射性同位素和有机溶剂,操作更为便捷,减少了实验误差,提高了实验结果的准确性。
1 细胞增殖与毒性检测（CCK8 法）一、实验目的 通过检测细胞活力来验证目的基因对细胞增殖的影响，或验证某种药物对细胞的毒性。二、实验原理 Cell Counting Kit-8(简称 CCK8) 试剂中含有 WST-8。活细胞特别是增殖期细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能够使 WST-8 还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）...
标准曲线还有助于确定细胞接种的合适数量以及摸索CCK-8后所需孵育时间。实验一:细胞增殖检测1.制备细胞悬液:选取对数生长期细胞,吸弃旧液,用PBS洗涤细胞后加入胰酶,待细胞全部变圆后加入等量完全培养液终止消化,800-1000rpn室温,离心5min后吸弃上清,加入完全培养液重悬细胞、计...
(1)增殖:8h或24h(细胞贴壁时间),之后每隔24小时检测下一天的细胞量(MTS 每孔加20μl,CCK8加10μl) (2)毒性和药物:培养24h后加入药物培养48小时及以上 3、增殖实验每天测量一次,以100全培养基:20MTS比例配制总管(CCK8以100:10) 4、吸掉96孔板内待测孔内培养基,每孔加入120μl稀释后的MTS试剂(CCK8加入...