8. 拍照时若有沉淀、结晶或较脏,要用PBS洗一遍,加培养基后再加CCK8。 9. 加CCK-8时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,干扰OD值。加CCK-8试剂时速度要快,减少试剂在移液器上的残留,加入CCK-8试剂后轻轻震培养板,为了避免加样时由于CCK-8 残留在枪头或壁上上所带来的误差。
实验流程和操作步骤 01实验分组(每组建议3-6个复孔)实验组:药物或者基因过表达等处理细胞+CCK-8试剂(见下表黄色列)对照组:不加药物等的对照细胞+CCK-8试剂(见下表绿色列)空白组:不加细胞的空白培养基+CCK-8试剂(见下表蓝色列)PBS孔:灰色,防止液体过度蒸发排版参考:02实验方案 1.种板细胞数:细...
吹匀细胞悬液,向96孔细胞培养板每孔中加入100微升细胞悬液,每个实验组设至少3个重复孔。 4.添加CCK-8试剂 根据细胞培养板的孔数,取相应量的CCK-8试剂并稀释到合适的浓度,通常使用CCK-8试剂与培养基的体积比为1:10(参考CCK8试剂盒说明书),然后取10微升CCK-8试剂加入到第0天的96孔细胞培养板中的每个孔中。
Cell Counting Kit-8(简称 CCK8) 试剂中含有 WST-8。活细胞特别是增殖期细胞的线粒体中的琥珀脱氢酶能够使 WST-8 还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比,用酶标仪在 450nm 波长处测定其吸收值,即可间接反映细胞增殖情况。三、实验步骤 1. 将细胞以 10...
02、实验步骤 1.通常使用96孔板进行CCK8细胞增殖实验,将细胞消化重悬为细胞悬液,根据文献或前期实验确定的种板浓度,对细胞悬液进行稀释后每孔加入100μL细胞悬液,设置培养基组每孔加入100μL完全培养基,每组设置3-6复孔,周围一圈孔原则上不应作为样品孔,每孔加入100μL的PBS。
四、方法及步骤: 实验一:细胞增殖分析 1、制备细胞悬液:细胞计数。 2、接种到96孔板中:根据合适的铺板细胞数(约1-2×104),每孔约100ul细胞悬液,同样的样本可做4-6个重复。 3、37℃培养箱中培养:细胞接种后贴壁大约需要培养4小时,如果不需要贴壁,这步可以省去。 4、加入10ul CCK8:由于每孔加入CCK8量比较...
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操作步骤 (一)实验材料及试剂: 酒精灯、移液枪、酶标仪(带有450nm滤光片)、96孔培养板、CO2培养箱、CCK-8、细胞计数板、PBS等。 (二)绘制标准曲线 1.制备细胞悬液:选取生长状态良好的对数生长期细胞制作细胞悬液,并计数。 2.在96孔板中接种细胞悬液 (100 μL/孔) :按比例依次用培养基等比稀释成一个细...
Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测试剂。WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】实验一:细胞增殖分析1)制备细胞悬液,计数。2)在96孔板中接种细胞悬液,每孔约100μl,同样的样本可做3个重复...
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