01实验分组（每组建议3-6个复孔）实验组：药物或者基因过表达等处理细胞+CCK-8试剂（见下表黄色列）对照组：不加药物等的对照细胞+CCK-8试剂（见下表绿色列）空白组：不加细胞的空白培养基+CCK-8试剂（见下表蓝色列）PBS孔：灰色，防止液体过度蒸发排版参考：02实验方案 1.种板细胞数：细胞增殖实验：每孔加...
该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。 02.实验流程 1、将处理过的细胞胰酶消化后计数,接种1000个细胞至96孔板,每孔100μl培养基,将培养板置37℃,5% CO₂培养箱中培养0 h、24h、48h和72h;2、每孔加入10μl CCK-8溶液,用加...
加CCK-8试剂时速度要快,减少试剂在移液器上的残留,加入CCK-8试剂后轻轻震培养板,为了避免加样时由于CCK-8 残留在枪头或壁上上所带来的误差。 10. CCK-8反复冻融会增加背景值,干扰实验测定。 11. 设置实验孔 (含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质) 阴性对照孔 (含有细胞的培养基、CCK-8、不含待测物质)...
CCK8(Cell Counting Kit-8)细胞增殖实验是一种通过检测细胞存活率来评估不同处理条件下细胞生存状况的实验方法。该实验利用CCK8试剂与细胞内的脱氢酶反应,生成紫色的甲臜产物,其颜色强度与细胞的代谢活跃度和存活率成正比。通过检测450nm波长下的吸光度值,可以间接反映出细胞的增殖情况。 2. CCK8细胞增殖实验所需的...
CCK-8(Cell Counting Kit-8)实验步骤 原理:CCK-8试剂盒中的WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)是一种黄色化合物,它在电子耦合试剂1-Methoxy PMS(1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色...
🔬 CCK8检测细胞增殖的原理:CCK8试剂中的主要成分WST-8能够在细胞内脱氢酶的作用下被氧化还原,生成水溶性的橙黄色甲臜。甲臜的生成量与活细胞的数量成正比,因此可以通过测量甲臜的量来评估细胞的增殖情况。📌 注意事项1️⃣ 接种细胞时,细胞悬液必须充分混匀,以避免细胞沉淀导致每孔中的细胞数量不一致。通常...
(1)增殖:8h或24h(细胞贴壁时间),之后每隔24小时检测下一天的细胞量(MTS 每孔加20μl,CCK8加10μl) (2)毒性和药物:培养24h后加入药物培养48小时及以上 3、增殖实验每天测量一次,以100全培养基:20MTS比例配制总管(CCK8以100:10) 4、吸掉96孔板内待测孔内培养基,每孔加入120μl稀释后的MTS试剂(CCK8加入...
接种到96孔板:根据实验需求,每孔加入约100ul的细胞悬液,细胞数量大约在1-2×10^4之间,每个样本可重复4-6次。 培养细胞:将96孔板放入37℃的培养箱中,细胞接种后大约需要4小时贴壁。如果不需要贴壁,可以跳过这一步。 加入CCK8:每孔加入10ul的CCK8试剂。由于量较少,建议使用二档吸一档打的方式,避免使用排枪。
一、CCK8实验:细胞增殖研究的得力助手 CCK8实验是一种简便而准确的细胞增殖和毒性分析方法。它利用一种特殊的试剂,通过检测细胞代谢产生的活性物质来评估细胞的增殖情况。与传统的细胞增殖实验方法相比,CCK8实验无需洗涤细胞,无需使用放射性同位素和有机溶剂,操作更为便捷,减少了实验误差,提高了实验结果的准确性。
Cell Counting Kit-8，简称CCK-8，主要成份是四唑盐WST-8，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成水溶性的formazan，其颜色深浅程度与细胞数量呈正比。因此，CCK-8试剂常用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等实验。CCK-8的优点 1. 产生的甲瓒产物是水溶性的，根本无需换液，...