二、实验原理 CCK8全称Cell Counting Kit-8试剂,可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有水溶性的四唑盐WST-8[化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐],它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下...
CCK-8细胞增殖实验原理基于细胞代谢产物对试剂的还原作用。CCK-8试剂中含有一种能被还原的黄色酶,当细胞活力高时,细胞内的代谢产物会将CCK-8试剂还原为有色产物。实验原理如下: 1. 细胞培养:将待测细胞接种于培养皿中,培养至适当的细胞数和状态。 2. 细胞处理:根据实际需求,对待测细胞进行处理,例如给予药物处理...
1. 细胞培养。胰酶消化法收集细胞，计数并重悬细胞，加入96孔板，100 μL/孔，并设置只加细胞培养液，不加细胞的孔，作为空白对照。每个实验组和空白对照组至少设置3个重复孔，以便测得的OD值可以做统计分析。2. CCK-8孵育。在细胞培养液中加入CCK-8试剂，10 μL/孔，轻轻震荡，混匀，继续培养。3. 吸光度值...
其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在540 或720nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法...
1. 原理不同: Mtt实验基于细胞内还原酶活性的检测,而CCK8实验基于细胞内活性代谢产生的水溶性四唑酮盐的还原反应。 2. 应用场景不同 Mtt实验适用于各种类型的细胞,包括悬浮细胞和贴壁细胞,适用于细胞增殖和细胞毒性等方面的研究;而CCK8实验适用于细胞增殖和毒性检测、药物筛选、细胞治疗等方面的应用。
实验一:细胞增殖分析 1、制备细胞悬液:细胞计数 2、接种到96孔板中:根据合适的铺板细胞数,每孔约100ul细胞悬液,同样的样本可做3个重复。 3、37℃培养箱中培养:细胞接种后贴壁大约需要培养2-4小时,如果不需要贴壁,这步可以省去。 4、加入10ul CCK8:由于每孔加入CCK8量比较少,有可能因试剂沾在孔壁上而带来误...
1. 原理不同: Mtt实验基于细胞内还原酶活性的检测,而CCK8实验基于细胞内活性代谢产生的水溶性四唑酮盐的还原反应。 2. 应用场景不同 Mtt实验适用于各种类型的细胞,包括悬浮细胞和贴壁细胞,适用于细胞增殖和细胞毒性等方面的研究;而CCK8实验适用于细胞增殖和毒性检测、药物筛选、细胞治疗等方面的应用。