拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 09生工吴超 200900140129 一、实验原理 T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒，长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因，感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织，失去分化能力。所以一般实验使用改造后的农杆菌——T-DNA中导入了卡...
十三模式植物拟南芥T-DNA插入突变体的PCR鉴定 2021/10/10 1 一、实验目的：▪1.学习用PCR方法检测生物遗传差异；▪2.了解植物T-DNA插入突变体的鉴定原理。2021/10/10 2 二、实验原理 1.Ti质粒和T-DNA ▪Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒，该质粒上有一段特殊的DNA区段，当农杆菌侵染植物细胞时，该DNA区...
在突变体研究中,需要的材料是纯合突变体。本次实验意在对模式植物拟南芥T-DNA插入突变体进行鉴定。实验中用到的主要实验方法有:CTAB法提取拟南芥基因组DNA、PCR扩增目的基因片段、琼脂糖凝胶电泳分离核酸。 PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成。每完成一个循环需2...
鉴定拟南芥T-DNA插入的突变体有专门的网站可以使用，它们分别是突变体突变信息查询网站，以及鉴定突变体的引物设计网站，具体的网站信息如下所示：突变信息查询网站：http://signal.salk.edu/cgi-bin/tdnaexpress/引物设计网站：http://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html 利用突变信息查询网站查询拟南芥T-DNA插入信...
1 知乎:三引物法鉴定T-DNA插入突变体 https://zhuanlan.zhihu.com/p/377200556 2 LP RP 引物设计网站: T-DNA Primer Design http://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html 3 简书: 拟南芥突变体信息查询 https://www.jianshu.com/p/db695e0756ba...
突变体可以通过自然突变和人工诱变的方法获得。 拟南芥诱变常用方法有EMS诱变、T-DNA插入突变、激活标签。 由于T-DNA插入突变体便于对突变基因进行追踪,目前拟南芥、水稻中已经有大量的T-DNA插入突变体;SALK中心提供的拟南芥T-DNA插入突变体超过十万种。 3、T-DNA插入突变原理 T-DNA,转移DNA(transferred DNA),是根瘤...
突变体是遗传学研究的最重要材料。 突变体可以通过自然突变和人工诱变的方法获得。 拟南芥诱变常用方法有EMS诱变、T-DNA插入突变、激活标签。 由于T-DNA插入突变体便于对突变基因进行追踪,目前拟南芥、水稻中已经有大量的T-DNA插入突变体;SALK中心提供的拟南芥T-DNA插入突变体超过十万种。 3、T-DNA插入突变原理 T-DN...
应用两种植物T-DNA插入突变体PCR鉴定方法,即"三引物法"和"双引物法"对拟南芥T-DNA插入突变体atsuc3(目的基因两条染色体均发生T-DNA插入的纯合突变体)进行鉴定和比较的结果表明,"三引物法"由于易产生非特异性扩增而无法得到PCR鉴定结果,从而导致鉴定失败;"双引物法"则可避免此种现象,得到可靠、有效的鉴定结果. ...
1、拟南芥拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定插入突变体的鉴定 实验目的实验目的1熟练掌握植物基因组DNA快速提取的方法;2掌握利用PCR方法鉴定拟南芥T-DNA插入突变体的方法。 T-DNA插入鉴定的原理突变体鉴定的步骤1. T-DNA插入基因的基因组序列;2. T-DNA插入方向的确定;3. T-DNA插入位置的确定;4. 引物设计;5. PCR扩...