[详解]根据题干“已知完整的基因E和T-DNA整合后,因片段长度过大,不能完成整个融合基因的PCR扩增”,且e的产生是T-DNA插入到基因E中,因此当拟南芥的基因型为EE时,用引物“Ⅱ+Ⅲ”组合,可以获得PCR产物,但用引物“I+Ⅲ”组合时,不能获得PCR产物;当拟南芥的基因型为Ee时,用引物“Ⅱ+Ⅲ”组合和引物“I+Ⅲ”...
(1)研究人员利用T-DNA插入拟南芥基因组中,T-DNA是农杆菌质粒的组成,所以种植野生型拟南芥,将地上部分浸入农杆菌悬浮液中以实现转化,该菌的T-DNA上需带有抗除草剂基因以便筛选。在适宜条件下培养,收获种子。 (2)假设所处理植株为T-DNA单拷贝插入,则T 1 代植株基因型为杂合子,自交后所结种子中具有抗除草剂性...
拟南芥T—DNA插入突变纯合体的实验中,T-DNA是根癌农杆菌Ti质粒上的一段DNA序列,它能稳定地整合到植物基因组中并稳定地表达。T—DNA在植物中一般都以低拷贝插入,多为单拷贝。单拷贝T-DNA一旦整合到植物基因组中,就会表现出孟德尔遗传特性,在后代中长期稳定表达,且插入后不再移动,便于保存。请结合你所学的知识,...
(1)研究人员利用T-DNA插入拟南芥基因组中,T-DNA是农杆菌质粒的组成,所以种植野生型拟南芥,将地上部分浸入农杆菌悬浮液中以实现转化,该菌的T-DNA上需带有抗除草剂基因以便筛选。在适宜条件下培养,收获种子。 (2)假设所处理植株为T-DNA单拷贝插入,则T1代植株基因型为杂合子,自交后所结种子中具有抗除草剂性状的...
25.(12分)为研究野生型拟南芥抗盐机理,研究人员利用T-DNA插入拟南芥基因组中,得突变体Y。(1)种植野生型拟南芥,将地上部分浸人菌悬浮液中以实现转化,该菌的T-DNA上需带有抗除草剂基因以便筛选。在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代)。(2)假设所处理植株为T-DNA单拷贝插入,则T1代植株自交后所结种子中具有抗...
8.2 拟南芥T-DNA基因插入突变鉴定反向遗传学则是在获得生物体基因组全部序列的基础上通过对靶基因进行必要的加工和修饰如定点突变基因插入缺失基因置换等再按组成顺序构建含生物体必需元件的修饰基因组让其装配出具有生命活性的个体研究生物体基因组的结构与功能以及这些修饰可能对生物体的表型性状有何种影响等方面的内容 ...
8.2 拟南芥T-DNA基因插入突变鉴定反向遗传学则是在获得生物体基因组全部序列的基础上通过对靶基因进行必要的加工和修饰如定点突变基因插入缺失基因置换等再按组成顺序构建含生物体必需元件的修饰基因组让其装配出具有生命活性的个体研究生物体基因组的结构与功能以及这些修饰可能对生物体的表型性状有何种影响等方面的内容 ...
解析 采用CTAB法提取拟南芥基因组,突变体 T-DNA插入采用 PCR 法和 Southem法检测,用TAIL-PCR 扩增参试突变体 T-DNA 插入位点的侧翼序列,用 DNAstar 软件分析取得的测序资料,分析T-DNA边界剪切位点,通过与拟南芥基因组数据库进行比对,即可确定T-DNA的插入位点。
用稀释至适当浓度的转化液对野生型拟南芥进行转化,T-DNA插入导致A基因的碱基对序列发生改变,即发生了基因突变,得到突变型拟南芥。 (2)分析表中记录可知,突变型拟南芥自交子代卡那霉素抗性:卡那霉素敏感=3:1,可判断突变型拟南芥的基因型为Aa;依据突变型与野生型杂交的正反交结果不同,推测A基因丧失影响雄配子的产生...
解析 【解析】采用CTAB法提取拟南芥基因组,突变体T-DNA插人采用PCR法和Southem法检测,用TAILPCR扩增参试突变体T-DNA插入位点的侧翼序列,用DNAstmr软件分析取得的测序资料,分析T-DNA边界剪切位点,通过与拟南芥基因组数据库进行比对,即可确定T-DNA的插入位点。