拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 09生工吴超 200900140129 一、实验原理 T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒,长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因,感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织,失去分化能力。所以一般实验使用改造后...
▪1.学习用PCR方法检测生物遗传差异;▪2.了解植物T-DNA插入突变体的鉴定原理。2021/10/10 2 二、实验原理 1.Ti质粒和T-DNA ▪Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒,该质粒上有一段特殊的DNA区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA区段能自发转移,插入植物染色体DNA中,Ti质粒上的这一段能转移的DNA被叫做T-...
突变体鉴定的步骤 1.T-DNA插入基因的基因组序列;2.T-DNA插入方向确实定;3.T-DNA插入位置确实定;4.引物设计;5.PCR扩增;6.电泳检测。T-DNA插入基因的基因组序列 点击基因编号进入网页 点击sequenceviewer进入 点击nucleotideview进入 点击突变体编号后进入的网页 进入网站查找基因突变体及插入方向 实验设计 T-...
在突变体研究中,需要的材料是纯合突变体。本次实验意在对模式植物拟南芥T-DNA插入突变体进行鉴定。实验中用到的主要实验方法有:CTAB法提取拟南芥基因组DNA、PCR扩增目的基因片段、琼脂糖凝胶电泳分离核酸。 PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成。每完成一个循环需2...
突变体是遗传学研究的最重要材料。 突变体可以通过自然突变和人工诱变的方法获得。 拟南芥诱变常用方法有EMS诱变、T-DNA插入突变、激活标签。 由于T-DNA插入突变体便于对突变基因进行追踪,目前拟南芥、水稻中已经有大量的T-DNA插入突变体;SALK中心提供的拟南芥T-DNA插入突变体超过十万种。 3、T-DNA插入突变原理 T-DN...
鉴定拟南芥T-DNA插入的突变体有专门的网站可以使用,它们分别是突变体突变信息查询网站,以及鉴定突变体的引物设计网站,具体的网站信息如下所示:突变信息查询网站:http://signal.salk.edu/cgi-bin/tdnaexpress/引物设计网站:http://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html 利用突变信息查询网站查询拟南芥T-DNA插入...
1 知乎:三引物法鉴定T-DNA插入突变体 https://zhuanlan.zhihu.com/p/377200556 2 LP RP 引物设计网站: T-DNA Primer Design http://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html 3 简书: 拟南芥突变体信息查询 https://www.jianshu.com/p/db695e0756ba...
突变体是遗传学研究的最重要材料。 突变体可以通过自然突变和人工诱变的方法获得。 拟南芥诱变常用方法有EMS诱变、T-DNA插入突变、激活标签。 由于T-DNA插入突变体便于对突变基因进行追踪,目前拟南芥、水稻中已经有大量的T-DNA插入突变体;SALK中心提供的拟南芥T-DNA插入突变体超过十万种。 3、T-DNA插入突变原理 T-DN...
1、 拟南芥t-dna插入突变体的鉴定摘要:我们用ctab法提取拟南芥的t-dna插入突变体的dna,然后用三引物法进行pcr和琼脂糖凝胶电泳来判断其为突变纯合体还是突变杂合体。通过这次实验,我们掌握了如何来判断纯和突变和杂合突变。关键字:拟南芥 t-dna插入突变 突变体的鉴定前言: 拟南芥 拟南芥是十字花科的植物,它是植物...