1、Co-IP的实验步骤 ● 细胞提取:从细胞或组织中提取蛋白质,可以使用细胞裂解缓冲液来破裂细胞膜,并添加蛋白酶抑制剂和磷酸酯酶抑制剂来保护蛋白质的完整性。 ● 抗体固定:将目标蛋白质的抗体与磁珠或琼脂糖小球等固相材料结合,形成抗体固定的材料。 ● 免疫沉淀:将细胞提取物与抗体固定的材料一起孵育,使目标蛋白...
📖 一、概念 免疫共沉淀技术(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)是基于抗体和抗原之间的特异性结合,用于检测和确定蛋白质之间的相互作用。🔬 二、原理 这个技术的基本原理是,将细胞在非变性条件下裂解,然后在细胞裂解液中加入特异性的抗体。这样,抗体和已知的抗原会形成抗原-抗体复合物。如果系统中存在与已知抗原相互...
免疫共沉淀技术(CO-IP)是体外研究蛋白质相互作用的一种技术。其原理如图1:A蛋白若能与B蛋白相互作用,被磁珠固定的抗A蛋白的抗体便可以将A蛋白、B蛋白共同沉淀下来。现欲研究水稻中抗虫调节蛋白D与C蛋白有无相互作用,将敲除了C蛋白基因的突变株均分为两组,分别导入含有空质粒(含GFP蛋白基因)、重组质粒(含有GFP蛋...
方法一：样本与目标蛋白的共孵育 IP抗体+裂解液→加入Protein A/G→Wash→Elution 特点：得率及蛋白纯...
免疫共沉淀技术(Co-IP)是在体外研究蛋白质间相互作用的一种技术。其原理是:抗体A可与蛋白A结合,使A“沉淀”,如果蛋白B与蛋白A相互结合形成复合体,那么抗体A在将蛋白A“沉淀”的同时,也会把蛋白B“沉淀”下来。某科研团队利用该技术研究细胞内三种蛋白α、β、γ间的相互作用,结果如图所示。下列说法中错误的是...
「卡梅德生物」蛋白互作之免疫共沉淀技术简介 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation, Co-IP）是一种研究蛋白质相互作用的常见方法，通过使用特异性抗体来捕获并沉淀目标蛋白质，进而检测与其相互作用的蛋白质复合物，该技术在生物学研究中广泛应用，特别是用于验证体内蛋白质-蛋白质相互作用。#免疫共沉淀# 基本原理 免疫共...
建议先做过表达CO-IP作为对照。Detaibio提供免疫共沉淀CO-IP检测服务，可对两种已知蛋白是否存在相互作用进行验证，也可以验证在总蛋白中是否含有与已知蛋白相互作用的未知蛋白。通过SDS-PAGE银染，结合Western Blot及液相质谱等对两种蛋白之间是否存在相互作用进行定性分析。
图1 Co-IP结果示例图（A代表protein A和B有相互作用，B代表protein A和B之间不存在相互作用）对结果进行分析之前，还需要了解图中的标注都是什么含义：IP：即指免疫沉淀（immunoprecipitation），用相应的抗体来纯化富集目的蛋白，例如图中“IP: Flag”的意思是用Flag标签抗体磁珠去拉Flag，与Flag融合表达的蛋白为...
Co-IP（免疫共沉淀，co-inmunoprecipitation）是经典的利用抗体从样品中捕获靶蛋白及其互作蛋白、复合体的一项技术，能够特异性富集所研究的目的蛋白。由于过程中采用了非变性条件，保留了互作及复合体的细胞内状态。相对于酵母双杂交、pull down等方法，其特色之一便是捕获的蛋白互作发生在所研究的特定组织细胞内，保存...
免疫共沉淀(Co-IP)是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。利用免疫共沉淀可以检测两个已知蛋白之间的相互作用,或者利用已知蛋白寻找与之相互作用的未知蛋白。相较于其他分子间相互作用检测方法(GST pull down等),...