图1A的IP组结果显示，在第三组沉淀复合物样本中均检测到了Myc和Flag，表明protein A和protein B之间存在相互作用；图1B IP组的第三组样本中只有Flag，而没有检测到Myc，代表protein A和protein B之间不存在相互作用。文献案例分析 了解Co-IP结果图一般含义后，我们再结合文献案例实战分析Co-IP的结果。（案例均引...
对于内源性Co-IP实验验证两个已知蛋白(FBW7和YTHDF2)是否存在相互作用,如果最终的结果为阳性(可查看Input组,代表阳性结果),则可以证明两个蛋白之间存在相互关系,比如本文就验证了FBW7可以与YTHDF2结合,存在相互作用。反之,如果结果为阴性(可查看IgG组结果,代表阴性结果),则无法证明两个蛋白之间不存在相互作用,也有...
实验共有四张胶图,分别为IB:Myc、IB:FLAG(这两张胶图为阳性对照),IP:FLAG IB:FLAG(IP组),IP:FLAG IB:Myc(Co-IP组)。结论解读1. Input组Input组:最下面的IB:Myc与IB:Flag两张图片,两个胶图为利用WB验证Myc-HDAC1及FLAG-ChREBP存在的阳性对照 。2. IP组IP组:用于证明IP能正常沉淀目的蛋白是有效的。...
Co-IP结果分析案例⼀ 该图为验证蛋⽩EDR1与蛋⽩EDR4之间是否存在相互作⽤的结果图。由图中可以得到，蛋⽩ EDR4带有GDP标签，蛋⽩EDR1带有FLAG标签，该实验为利⽤蛋⽩标签来沉淀和检测蛋⽩；该co-ip实验实验被分为两组，第⼀组存在GFP标签及EDR1-FLAG蛋⽩，第⼆组存在EDR4- GFP蛋⽩及...
Co-IP实验标准操作全流程、实验结果图解读、实验常见问题分析&解决、实际应用场景等 ,一文帮助大家掌握免疫共沉淀技术。 如果有任何Co-IP实验问题,可以加福麦斯生物的Co-IP实验互助群,0广告,有技术老师还有很多热心的同学一起探讨! 一、Co-IP实验原理
首先,需要确定融合标签的目的,蛋白纯化首选His-Tag,WB首选Flag-Tag,Co-IP可选择Flag-Tag或其他常用标签如HA、cMyc,活细胞成像则应该选择荧光蛋白等。 好了,两种比较经典的co-IP实验结果的图片解读今天就讲解完了。小薇提供语言润色、论文降重和专家评估,有需要的欢迎随时来撩~同事,有任何问题欢迎添加小薇VX随时沟通...
上次分享了免疫共沉淀的基本原理及实验对照设计原则,今天我们利用上次所学知识来尝试解读文献中的CO-IP结果图。 文献图解一 该图为验证蛋白EDR1与蛋白EDR4之间是否存在相互作用的结果图。由图可以得到的信息如下: ◆ 蛋白EDR4带有GFP标签,蛋白EDR1带有FLAG标签,该实验为利用蛋白标签来沉淀和检测蛋白; ...
1、定量或者定性质谱数据；2、raw文件；3、analysis文件夹，数据分析结果；4、实验报告。文献举例 图 Co-IP实验结果展示 撰写文章时，该实验可引用以下参考文献Isono E, Schwechheimer C. Co-immunoprecipitation and protein blots. Methods Mol Biol. 2010;655:377-387.Lin JS, Lai EM. Protein-Protein ...
假阳性结果需要设置对应的阴性对照组一一排除，假设实验组为琼脂糖珠+抗体X+靶蛋白X+抗体Y+目的蛋白Y：※ 最后的实验结果是阴性的，是否能说明两个蛋白之间无相互作用？对于内源性Co-IP实验，阴性结果不能百分百说明无相互作用，也有可能是蛋白在细胞内表达过低导致，因此建议先做过表达Co-IP作为对照。
上次分享了免疫共沉淀的基本原理及实验对照设计原则免疫共沉淀(Co-IP)结果图解读(上),今天我们利用上次所学知识来尝试解读文献中的CO-IP结果图。 案例一 该图为验证蛋白EDR1与蛋白EDR4之间是否存在相互作用的结果图。由图中可以得到,蛋白EDR4带有GDP标签,蛋白EDR1带有FLAG标签,该实验为利用蛋白标签来沉淀和检测蛋白...