图1A的IP组结果显示，在第三组沉淀复合物样本中均检测到了Myc和Flag，表明protein A和protein B之间存在相互作用；图1B IP组的第三组样本中只有Flag，而没有检测到Myc，代表protein A和protein B之间不存在相互作用。文献案例分析 了解Co-IP结果图一般含义后，我们再结合文献案例实战分析Co-IP的结果。（案例均引...
结论解读1. Input组Input组:最下面的IB:Myc与IB:Flag两张图片,两个胶图为利用WB验证Myc-HDAC1及FLAG-ChREBP存在的阳性对照 。2. IP组IP组:用于证明IP能正常沉淀目的蛋白是有效的。第二张胶图(IP:Flag,IB:Flag),表示的实验操作是利用anti-FLAG沉淀FLAG-ChREBP蛋白,图上显示经IB验证第二、第三组FLAG-ChRE...
对于内源性Co-IP实验验证两个已知蛋白(FBW7和YTHDF2)是否存在相互作用,如果最终的结果为阳性(可查看Input组,代表阳性结果),则可以证明两个蛋白之间存在相互关系,比如本文就验证了FBW7可以与YTHDF2结合,存在相互作用。反之,如果结果为阴性(可查看IgG组结果,代表阴性结果),则无法证明两个蛋白之间不存在相互作用,也有...
说到Co-IP(免疫共沉淀)实验原理,就不得不提到IP(免疫沉淀)了:IP是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等固相支持物上的特异性抗体对抗原进行亲和纯化的方法。基本原理是抗原-抗体特异性结合,检测目的是富集分离蛋白。 Co-IP是IP的延伸,主要是用于探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理是如果两个蛋...
首先,需要确定融合标签的目的,蛋白纯化首选His-Tag,WB首选Flag-Tag,Co-IP可选择Flag-Tag或其他常用标签如HA、cMyc,活细胞成像则应该选择荧光蛋白等。 好了,两种比较经典的co-IP实验结果的图片解读今天就讲解完了。小薇提供语言润色、论文降重和专家评估,有需要的欢迎随时来撩~同事,有任何问题欢迎添加小薇VX随时沟通...
Co-IP实验原理在于，使用目标蛋白抗体免疫沉淀后，结合的目标蛋白与之相连的蛋白质一同被沉淀下来。离心沉淀后，去除未沉淀的蛋白，通过WB检测沉淀物中的目标蛋白和其他蛋白的量，从而分析它们的结合情况。该方法常用于研究蛋白质在细胞内的相互作用。如上图所示，实验结果通过WB条带的灰度值体现。灰度值的...
对于内源性Co-IP实验，验证两个已知蛋白（FBW7和YTHDF2）的相互作用，若结果为阳性，则证明了两个蛋白存在相互作用。反之，阴性结果可能表明蛋白表达量低或其他原因，建议进行过表达Co-IP实验。今天，我们解读了Co-IP实验结果图的解析方法，希望您能更好地理解这些图。关注后续内容，更多解读等您来探索...
Co-IP全称Co-Immunoprecipitation,中文学名免疫共沉淀,是一种以抗体和抗原识别专一性为基础,用于研究蛋白质之间相互作用的经典方法。 通俗点来说,假设我们需要研究样品中A蛋白和B蛋白之间是否存在一些相互作用,首先我们通过合适的方法处理样本,将蛋白提取出来(同时不能破坏蛋白之间的相互作用),然后用预先结合了琼脂糖珠或...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是根据抗体与抗原特异性结合的原理发展起来的一种研究体内蛋白质相互作用技术。该技术使用专一性抗体特异性识别并结合两个相互作用的蛋白复合体,形成抗体-蛋白A-蛋白B复合物,使相互作用的蛋白A和B共同沉淀下来。其原理简图如下: 百泰派克生物科技使用Thermo公司最新推出的Obitrap...
免疫共沉淀广泛应用于研究蛋白质相互作用。上图展示了特定处理条件下蛋白质的相互作用情况。例如，“IP”代表免疫沉淀，“IB”表示免疫印迹（WB），而“Input”是原始样品，用于估计IP反应中目标蛋白的含量。在“SENCR shRNA”处理条件下，通过加入抗JUP抗体将JUP蛋白沉淀出来，然后使用抗CDH5抗体检测CDH5...