(1)高度特异性:CO-IP免疫共沉淀技术通过选择特定的抗体,可以高度特异地富集目标蛋白质及其相互作用伙伴,减少非特异性的干扰。(2)高灵敏度:CO-IP免疫共沉淀技术可以检测低丰度的蛋白质相互作用,有助于发现新的蛋白质复合体。(3)可定量分析:CO-IP免疫共沉淀技术可以通过Western blot等方法对目标蛋白质及其...
方法一:样本与目标蛋白的共孵育 IP抗体+裂解液→加入Protein A/G→Wash→Elution 特点:得率及蛋白纯...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 其原理是使用靶蛋白特异性抗体间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白来鉴定体内相关的蛋白-蛋白相互作用,是研究蛋白质互作的经典方法。特异性抗体...
图1 Co-IP结果示例图(A代表protein A和B有相互作用,B代表protein A和B之间不存在相互作用)对结果进行分析之前,还需要了解图中的标注都是什么含义:IP:即指免疫沉淀(immunoprecipitation),用相应的抗体来纯化富集目的蛋白,例如图中“IP: Flag”的意思是用Flag标签抗体磁珠去拉Flag,与Flag融合表达的蛋白为诱...
上期干货中,为大家介绍了免疫共沉淀(Co-IP)的实验原理和相关实验操作步骤,这为读懂Co-IP实验结果的前提,因此本文针对Co-IP结果进行分析解读,从结果图注含义到实际案例逐一进行。 Co-IP实验结果内容解读 (1…
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G”特异性地结合抗体Fc段的现象而开发出来的方法,主要用于确定两种蛋白质在完整细胞内是否存在生理性相互作用。▼应用场景利用质谱鉴定相互作用蛋白;蛋白相互作用的验证;缺失分析联合co-IP进行蛋白互作结构域分析;...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种利用抗原与抗体之间的专一性为基础,广泛应用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的经典研究方法。原理如果细胞内两蛋白(A、B)有直接或间接的相互作用时,那么在温和的裂解条件下获得的蛋白样品中加入 A 蛋白的抗体将A蛋白沉淀下来,在细胞内与A蛋白直接相互作用的B蛋白或与其...
免疫共沉淀(Co-IP)是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。利用免疫共沉淀可以检测两个已知蛋白之间的相互作用,或者利用已知蛋白寻找与之相互作用的未知蛋白。 相较于其他分子间相互作用...
Co-IP全称Co-Immunoprecipitation,中文学名免疫共沉淀,是一种以抗体和抗原识别专一性为基础,用于研究蛋白质之间相互作用的经典方法。通俗点来说,假设我们需要研究样品中A蛋白和B蛋白之间是否存在一些相互作用,首先我们通过合适的方法处理样本,将蛋白提取出来(同时不能破坏蛋白之间的相互作用),然后用预先结合了琼脂...
Co-IP 用于检测两种或两种以上蛋白质之间的相互作用。通过使用针对不同蛋白质的抗体,Co-IP可以揭示蛋白质复合体的组成成分,是研究信号传导和细胞调控网络的有力工具。ChIP 专注于研究蛋白质与DNA的相互作用,尤其是转录因子或组蛋白修饰与特定基因启动子区域的结合。ChIP实验结合了IP和DNA测序(ChIP-Seq)技术,极大...