免疫共沉淀(Co- Immunoprecipitation, Co-IP)是利用抗原和抗体的特异性结合以及细菌的Protein A或G特异性地结合到免疫球蛋白的Fc片段的现象开发出来的方法。 其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Agarose珠上的Protein A或G,若细胞中有与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可...
方法一:样本与目标蛋白的共孵育 IP抗体+裂解液→加入Protein A/G→Wash→Elution 特点:得率及蛋白纯...
(1)高度特异性:CO-IP免疫共沉淀技术通过选择特定的抗体,可以高度特异地富集目标蛋白质及其相互作用伙伴,减少非特异性的干扰。(2)高灵敏度:CO-IP免疫共沉淀技术可以检测低丰度的蛋白质相互作用,有助于发现新的蛋白质复合体。(3)可定量分析:CO-IP免疫共沉淀技术可以通过Western blot等方法对目标蛋白质及其...
特异性抗体捕获样品中的靶蛋白,形成抗体-靶蛋白复合物,然后利用能够与抗体结合的珠状支持物(例如Nanoab-Aga- rose)来固定和沉淀复合物,同时与靶蛋白相互作用的蛋白也会被沉淀下来,最后洗去与靶蛋白相结合的非特异性蛋白,再通过SDS-PAGE进行分析、Western blot检测。背景说明 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,...
一、Co-IP实验原理 1、原理解析 说到Co-IP(免疫共沉淀)实验原理,就不得不提到IP(免疫沉淀)了:IP是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等固相支持物上的特异性抗体对抗原进行亲和纯化的方法。基本原理是抗原-抗体特异性结合,检测目的是富集分离蛋白。 Co-IP是IP的延伸,主要是用于探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用...
免疫共沉淀(Co-IP)是一种基于抗体和抗原之间的专一性作用,用于检测和确定生理条件下蛋白质之间相互作用的方法。这种方法的基本原理是将蛋白质视为抗原,并利用抗体与之进行特异性结合的特性来进行研究。 当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用预先固化在ar...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,用于确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用。与其他蛋白互作研究技术,比如酵母双杂、Pull-down等各有优势,其中Co-IP基于抗原和抗体之间结合,可以从复杂的细胞裂解液中特异性地分离和鉴定蛋白质复合...
建议先做过表达CO-IP作为对照。Detaibio提供免疫共沉淀CO-IP检测服务,可对两种已知蛋白是否存在相互作用进行验证,也可以验证在总蛋白中是否含有与已知蛋白相互作用的未知蛋白。通过SDS-PAGE银染,结合Western Blot及液相质谱等对两种蛋白之间是否存在相互作用进行定性分析。
免疫共沉淀(Co-IP)是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础,用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。利用免疫共沉淀可以检测两个已知蛋白之间的相互作用,或者利用已知蛋白寻找与之相互作用的未知蛋白。 相较于其他分子间相互作用...
IP免疫共沉淀(immunoprecipitation,IP)是一种常用的蛋白质相互作用研究技术。该技术利用抗体与目标蛋白的特异性结合,将目标蛋白及其结合蛋白从混合物中沉淀下来,从而实现对目标蛋白的富集和分离。IP技术可以用于研究蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质-核酸相互作用以及蛋白质-小分子相互作用等。IP技术的基本步骤包括:1)...