1.用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。 2.将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。 3.收集上清(约30 ml)并加入30μg的适当抗体,4℃摇动免疫沉淀物1 h。 4.加入0.9 ml的蛋白A-Sepharose悬液,4℃摇动...
免疫共沉淀(Co-IP)详细步骤教程 一、 原理:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞… Frdbio重组蛋白与抗体研发平台 免疫共沉淀(Co-IP)详细操作流程 岚solo发表于细胞分离 免疫共沉淀Co-IP的实验优化 爱必信生物发表于...
嘿,你问IP免疫共沉淀实验步骤啊?那咱就来说道说道。 第一步呢,准备材料。你得有细胞样品啦,还有各种抗体、蛋白A/G磁珠啥的。就像做饭得先准备好食材一样,这些东西可一个都不能少哦。细胞样品得处理得好好的,别弄乱了。 第二步,裂解细胞。这就好比把一个大包裹打开,把里面的东西都倒出来。用合适的裂解液把...
第二讲:免疫共沉淀(co-IP)实验技术流程及常见问题应对 1.2万 3 9:46 App 研究蛋白泛素化的方法:离体泛素化实验/IP+泛素化检测/MG132处理/CHX处理 7395 -- 9:30 App CHIP实验 | 染色质免疫共沉淀实验操作流程图解及原理解说 2556 -- 9:10 App 生物学小白不容错过~IP免疫共沉淀实验全流程之(一)保姆级...
IP实验之CHIP-染色质免疫共沉淀,师姐说:原理、步骤、结果都一次性说清楚了!立夏0202编辑于 2024年10月31日 22:39 三个结果都是ok的,第三张分子量不同也是可以的,说明chip 引物特异性不是很好 产物少用tagman探针法;产物充裕用sybre法分享至 投诉或建议...
蛋白质免疫沉淀 | COIP实验操作要点,实验步骤,数据分析 1929 -- 11:21 App 生物学小白不容错过~IP免疫共沉淀实验全流程之(二)保姆级细胞转染! 1730 -- 7:50 App 生物学小白不容错过~IP免疫共沉淀实验全流程(八)裁膜及一抗孵育! 1.4万 1 3:29 App 3分钟看懂IP与COIP的区别与联系 2136 -- 10:10 ...
免疫共沉淀(Co-IP实验)步骤 1 用磷酸盐缓冲液洗 30块 10 cm培养板上的适宜细胞。 刮去每块板上的细胞到 1 ml冰冷的 EBC裂解缓冲液中。 2 将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中, 在微量离心机上 4 ℃以最大速度离心 15 min。 3 收集上清 (约 30 ml)并加入 30 μg的适当抗体, 4℃摇动免疫沉淀物 1...
免疫共沉淀(Co-IP)详细步骤教程 一、原理 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是研究蛋白质相互作用的有效方法。它基于抗体和抗原之间的专一性作用，能保留细胞内蛋白质间的天然相互作用。通过用蛋白质X的抗体沉淀X，能同时沉淀与其结合的蛋白质Y，用于检测两种蛋白质的体内结合。二、准备工作 准备预冷的...
Co-IP(免疫共沉淀,co-inmunoprecipitation)是经典的利用抗体从样品中捕获靶蛋白及其互作蛋白、复合体的一项技术,能够特异性富集所研究的目的蛋白。 免疫共沉淀Co-IP实验步骤 细胞转染 1.铺细胞,转染细胞。本次转染的两个蛋白分别带有FLAG和HA标签。 裂解细胞 ...
本实验一共分为两大组：Input组及IP组，其中IP组又分为IgG组（阴性对照组）和实验组，并通过WB去验证蛋白A和B在每一个组里面是否存在。由Input组的条带可以得到结论：蛋白A与蛋白B都是存在的，证明样本处理提取蛋白的步骤没有任何问题。阴性对照IgG组和实验组平行进行免疫沉淀实验，结果蛋白A与蛋白B均没有条带...