(1)高度特异性:CO-IP免疫共沉淀技术通过选择特定的抗体,可以高度特异地富集目标蛋白质及其相互作用伙伴,减少非特异性的干扰。(2)高灵敏度:CO-IP免疫共沉淀技术可以检测低丰度的蛋白质相互作用,有助于发现新的蛋白质复合体。(3)可定量分析:CO-IP免疫共沉淀技术可以通过Western blot等方法对目标蛋白质及其...
这有可能是结合较弱或清洗不干净导致的 2、内源的 Co-IP 实验结合较弱或者不结合 可能是蛋白表达较弱,建议做过表达的 Co-IP
方法一:样本与目标蛋白的共孵育 IP抗体+裂解液→加入Protein A/G→Wash→Elution 特点:得率及蛋白纯...
Co-IP实验通常有两种,一种为内源性蛋白相互作用验证,另外一种为非内源性蛋白相互作用验证,内源性相互作用是指两蛋白相互作用在细胞内发生,即通过质粒共转染的方式将两种蛋白转染至同一细胞内表达,表达完成后收集细胞进行裂解得到蛋白样...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G”特异性地结合抗体Fc段的现象而开发出来的方法,主要用于确定两种蛋白质在完整细胞内是否存在生理性相互作用。▼应用场景利用质谱鉴定相互作用蛋白;蛋白相互作用的验证;缺失分析联合co-IP进行蛋白互作结构域分析;...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 其原理是使用靶蛋白特异性抗体间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白来鉴定体内相关的蛋白-蛋白相互作用,是研究蛋白质互作的经典方法。特异性抗体...
图1 Co-IP结果示例图(A代表protein A和B有相互作用,B代表protein A和B之间不存在相互作用)对结果进行分析之前,还需要了解图中的标注都是什么含义:IP:即指免疫沉淀(immunoprecipitation),用相应的抗体来纯化富集目的蛋白,例如图中“IP: Flag”的意思是用Flag标签抗体磁珠去拉Flag,与Flag融合表达的蛋白为...
免疫共沉淀(Co- Immunoprecipitation, Co-IP)是利用抗原和抗体的特异性结合以及细菌的Protein A或G特异性地结合到免疫球蛋白的Fc片段的现象开发出来的方法。 其基本原理是,在细胞裂解液中加入抗兴趣蛋白的抗体…
一、Co-IP实验原理 1、原理解析 说到Co-IP(免疫共沉淀)实验原理,就不得不提到IP(免疫沉淀)了:IP是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等固相支持物上的特异性抗体对抗原进行亲和纯化的方法。基本原理是抗原-抗体特异性结合,检测目的是富集分离蛋白。 Co-IP是IP的延伸,主要是用于探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用...
蛋白质作为生命活动的重要分子之一,发挥着关键的作用。蛋白质的作用大多通过蛋白质之间的相互作用得以发挥,众多研究蛋白质互作的技术被开发出来。其中Co-IP全称Co-immunopreciptation,即免疫共沉淀,是一项被广泛使用的工具之一。 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究...