免疫共沉淀(co-inmunoprecipitation, Co-IP or CoIP)是研究体内蛋白质-蛋白质相互作用以及建立蛋白间相互作用关系的有力工具,是经典的在生理条件下利用抗体从样品中捕获靶蛋白及其互作蛋白、复合体,能够特异性富集所研究的目的蛋白及其结合蛋白的一项技术,是确定蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 Co-IP实...
5年免疫共沉淀Co-IP经验总结 (word版) 一、原理:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的 - 章鱼哥的医学科研于20241025发布在抖音,已经收获了
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种以抗体和抗原之间的特异免疫反应为基础,研究蛋白质与蛋白质间相互作用的经典方法。其基本原理是在细胞裂解液中加入抗原特异性的抗体,抗体、抗原、以及与抗原具有相互作用的蛋白质通过抗原与抗体之间免疫沉淀反应将形成免疫复合物,经过纯化,洗脱,收集免疫复合物,SDS-PAGE电...
D、从板上刮下细胞,把裂解液转移至1.5mL EP管中,置于冰上,在冰上进行3次超声破碎,每次5s; E、在4℃条件下,14000g离心10min,将上清液转移到新EP管中,向每个分组中提取80μL上清液作为对应Co-IP的input组; 2)免疫沉淀 A、向剩余的细胞裂解液中添加5μL Protein A和5μL Protein G,4℃冰箱内旋转孵育30...
百泰派克标准Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法的一般程序如下: • 制备蛋白质混合物,细胞裂解液或组织提取物 • 用抗体结合的亲和珠孵育蛋白质混合物,细胞裂解物或组织提取物 • 通过多个洗涤步骤清除未结合的蛋白质 • 通过SDS-PAGE,蛋白质印迹或质谱(MS)分析检测相互作用蛋白 ...
Co-IP实验涉及以下步骤：首先，以细胞内源性靶蛋白为诱饵，使用特异性识别靶蛋白的抗体与细胞总蛋白共孵育以形成免疫复合物；随后，加入蛋白A/G（预先结合在琼脂糖凝胶或磁珠上）以捕获与靶蛋白有相互作用的蛋白，形成复合物。通过凝胶电泳分离纯化后，应用Western blot或质谱技术鉴定目标蛋白的结合蛋白或...
免疫共沉淀(Co-IP)是基于免疫学原理研究蛋白质相互作用的经典方法,通过使用靶蛋白特异性抗体来间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白,从而识别生理相关的蛋白-蛋白相互作用,并可通过质谱技术来鉴定新的相互作用蛋白质。 SILAC(Stable isotope labeling using amino acids in cell culture)细胞培养条件下稳定同位素标记技术是一...
CO-IP是用于检测或探究蛋白与蛋白之间相互作用的实验,属于IP实验的扩展,在样品溶液中,捕获和纯化通过天然相互作用及靶标结合的其他大分子蛋白,基于抗原抗体的特异性免疫结合,以饵蛋白为诱饵蛋白,通过饵蛋白抗体捕获,磁珠吸附结合,进而将饵蛋白结合的互作蛋白捕获得到,纯化定量定性分析。 实验操作步骤: 1.样本准备 组织...
此co-IP 试剂盒非常适合在沉降过程中维持蛋白质复合物。 “Dynabeads 绝对是我们迄今为止发现的更好用的大型复合物提取技术。” 洛克菲勒大学 Michael P. Rout 博士 如果您使用 Sepharose 微珠和离心柱等技术进行沉降,请注意,您的蛋白质复合物可能因暴露于大表面、机...
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体...