E、使用 0.5mL 1×Wash buffer 清洗沉淀,12000g离心1min,保留沉淀,重复清洗3次; 3)用Western blot进行样品分析 A、在40μL 1×SDS 样品缓冲液中重悬沉淀物,并向80μL的input组中加入5×蛋白上样缓冲液20μL,一并涡旋振荡; B、然后再12000g离心30s,以使附着管壁的珠子和液体到管底; C、将所有样品在金...
Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法的原理是利用抗原-抗体相互作用拉下靶蛋白的方式推定相互作用的蛋白。具体而言,将目标蛋白的抗体固定在亲和树脂中,然后将其暴露于设计的蛋白混合物或细胞提取液中,与目标蛋白质有强相互作用的蛋白质或蛋白质复合物将被共沉淀。 这些相互作用蛋白的身份和数量可以通过后续基于质谱的互作...
SPR 技术检测蛋白分子互作时,只需通过简单的几个步骤,如只需将蛋白X的抗体固定到芯片上,之后注入蛋白X即可将其沉淀下来,同时与 X 在体内结合的蛋白质Y或者Z 等也能共同被沉淀下来。并利用双抗夹心法验证Y或Z蛋白,时间最快只需15min,也可洗脱分析相上质谱、测序仪分析未知的蛋白或核酸,将传统Co-IP 2天的实验...
扫码打开 手机搜狐网 无需下载APP 精彩内容随时看蛋白互作研究方法之免疫共沉淀(Co-IP)技术 2020-11-20 14:58 返回搜狐,查看更多平台声明:该文观点仅代表作者本人,搜狐号系信息发布平台,搜狐仅提供信息存储空间服务。首赞 +1 阅读() 内容举报大家都在看 我来说两句 0人参与, 0条评论 登录并发表 搜狐“...
百泰派克标准Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法的一般程序如下: • 制备蛋白质混合物,细胞裂解液或组织提取物 • 用抗体结合的亲和珠孵育蛋白质混合物,细胞裂解物或组织提取物 • 通过多个洗涤步骤清除未结合的蛋白质 • 通过SDS-PAGE,蛋白质印迹或质谱(MS)分析检测相互作用蛋白 ...
百泰派克标准Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法的一般程序如下: • 制备蛋白质混合物,细胞裂解液或组织提取物• 用抗体结合的亲和珠孵育蛋白质混合物,细胞裂解物或组织提取物• 通过多个洗涤步骤清除未结合的蛋白质• 通过SDS-PAGE,蛋白质印迹或质谱(MS)分析检测相互作用蛋白*百泰派克提供基于质谱的CO-IP样品蛋...
[原创]CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析 免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)技术是一种通过使用能够与蛋白质结合的抗体从溶液中分离出特定蛋白质的技术,是抗原纯化和检测中使用最广泛的方法之一。通过添加不溶形式的抗体结合蛋白(例如与琼脂糖浆液或新近流行的磁珠缀合的蛋白A或Protein G)从溶液中去除抗体-蛋白复合物。
百泰派克标准Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法的一般程序如下: • 制备蛋白质混合物,细胞裂解液或组织提取物 • 用抗体结合的亲和珠孵育蛋白质混合物,细胞裂解物或组织提取物 • 通过多个洗涤步骤清除未结合的蛋白质 • 通过SDS-PAGE,蛋白质印迹或质谱(MS)分析检测相互作用蛋白 ...
Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法的原理是利用抗原-抗体相互作用拉下靶蛋白的方式推定相互作用的蛋白。具体而言,将目标蛋白的抗体固定在亲和树脂中,然后将其暴露于设计的蛋白混合物或细胞提取液中,与目标蛋白质有强相互作用的蛋白质或蛋白质复合物将被共沉淀。这些相互作用蛋白的身份和数量可以通过后续基于质谱的互作...