免疫共沉淀(co-inmunoprecipitation, Co-IP or CoIP)是研究体内蛋白质-蛋白质相互作用以及建立蛋白间相互作用关系的有力工具,是经典的在生理条件下利用抗体从样品中捕获靶蛋白及其互作蛋白、复合体,能够特异性富集所研究的目的蛋白及其结合蛋白的一项技术,是确定蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 Co-IP实...
5年免疫共沉淀Co-IP经验总结 (word版) 一、原理:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的 - 章鱼哥的医学科研于20241025发布在抖音,已经收获了
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是一种以抗体和抗原之间的特异免疫反应为基础,研究蛋白质与蛋白质间相互作用的经典方法。其基本原理是在细胞裂解液中加入抗原特异性的抗体,抗体、抗原、以及与抗原具有相互作用的蛋白质通过抗原与抗体之间免疫沉淀反应将形成免疫复合物,经过纯化,洗脱,收集免疫复合物,SDS-PAGE电...
D、从板上刮下细胞,把裂解液转移至1.5mL EP管中,置于冰上,在冰上进行3次超声破碎,每次5s; E、在4℃条件下,14000g离心10min,将上清液转移到新EP管中,向每个分组中提取80μL上清液作为对应Co-IP的input组; 2)免疫沉淀 A、向剩余的细胞裂解液中添加5μL Protein A和5μL Protein G,4℃冰箱内旋转孵育30...
rProtein A/G Magnetic IP/Co-IP Kit 是一款能够高效完成免疫沉淀(IP)及免疫共沉淀(Co-IP)实验的试剂盒。其包含高性能 rProtein A/G MagPoly Beads,能够实现快速便捷的磁性分离。另外试剂盒内经过优化的缓冲液,为免疫沉淀实验提供了良好的反应条件,增强了免疫沉淀实验的稳定性。聚合物磁珠的配体是重组蛋白 A/...
Co-IP的结果需要与其他验证方式进行比较和确认。其他常用的验证方法包括双杂交、荧光共定位、GST pull-down等。这些方法可以提供互补的信息,帮助确定蛋白质相互作用的可靠性。 如果Co-IP验证出两个蛋白质相互作用,但其他验证方式却没有检测到这种互作,可能有以下几个原因:首先,Co-IP可能存在假阳性结果,即非特异性结...
此co-IP 试剂盒非常适合在沉降过程中维持蛋白质复合物。 “Dynabeads 绝对是我们迄今为止发现的更好用的大型复合物提取技术。” 洛克菲勒大学 Michael P. Rout 博士 如果您使用 Sepharose 微珠和离心柱等技术进行沉降,请注意,您的蛋白质复合物可能因暴露于大表面、机...
百泰派克标准Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法的一般程序如下: • 制备蛋白质混合物,细胞裂解液或组织提取物 • 用抗体结合的亲和珠孵育蛋白质混合物,细胞裂解物或组织提取物 • 通过多个洗涤步骤清除未结合的蛋白质 • 通过SDS-PAGE,蛋白质印迹或质谱(MS)分析检测相互作用蛋白 ...
免疫共沉淀(co-inmunoprecipitation, Co-IP 或 CoIP)是研究蛋白质间相互作用的关键工具，能够从细胞中捕获靶蛋白及其互作蛋白。这一技术在生理条件下利用抗体富集所研究的目的蛋白及其结合蛋白，是确定蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。Co-IP实验涉及以下步骤：首先，以细胞内源性靶蛋白为诱饵...
CO-IP是用于检测或探究蛋白与蛋白之间相互作用的实验,属于IP实验的扩展,在样品溶液中,捕获和纯化通过天然相互作用及靶标结合的其他大分子蛋白,基于抗原抗体的特异性免疫结合,以饵蛋白为诱饵蛋白,通过饵蛋白抗体捕获,磁珠吸附结合,进而将饵蛋白结合的互作蛋白捕获得到,纯化定量定性分析。 实验操作步骤: 1.样本准备 组织...