(1)高度特异性:CO-IP免疫共沉淀技术通过选择特定的抗体,可以高度特异地富集目标蛋白质及其相互作用伙伴,减少非特异性的干扰。(2)高灵敏度:CO-IP免疫共沉淀技术可以检测低丰度的蛋白质相互作用,有助于发现新的蛋白质复合体。(3)可定量分析:CO-IP免疫共沉淀技术可以通过Western blot等方法对目标蛋白质及其...
免疫共沉淀技术(CO-IP)是体外研究蛋白质相互作用的一种技术。其原理如图1:A蛋白若能与B蛋白相互作用,被磁珠固定的抗A蛋白的抗体便可以将A蛋白、B蛋白共同沉淀下来。现欲研究水稻中抗虫调节蛋白D与C蛋白有无相互作用,将敲除了C蛋白基因的突变株均分为两组,分别导入含有空质粒(含GFP蛋白基因)、重组质粒(含有GFP蛋...
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告,检测结果可在线查看或打印,并永久保留。Co-IP 结题标准 1、阳性对照即Iput组有条带(且条带大小正确)2、实验组即IP组有条带(且条带大小正确)实验交付内容 1、重组...
蛋白样品通常通过裂解细胞得到。Co-IP实验通常有两种,一种为内源性蛋白相互作用验证,另外一种为非内源性蛋白相互作用验证,内源性相互作用是指两蛋白相互作用在细胞内发生,即通过质粒共转染的方式将两种蛋白转染至同一细胞内表达,表达完...
IP抗体+裂解液→加入Protein A/G→Wash→Elution 特点:得率及蛋白纯度最高。方法二:抗体与微珠的共...
1. Co-IP技术原理 Co-IP技术,是用于检测蛋白质相互作用的一种方法。该实验基于免疫学原理,利用与目标蛋白质特异性结合的抗体对其进行识别和富集。当目标蛋白质和其配体或互作伴侣结合在一起时,进一步通过洗涤、洗脱和分析等步骤,以便完全确定目标蛋白质和其互作伴侣的身份和相互作用模式。
建议先做过表达CO-IP作为对照。Detaibio提供免疫共沉淀CO-IP检测服务,可对两种已知蛋白是否存在相互作用进行验证,也可以验证在总蛋白中是否含有与已知蛋白相互作用的未知蛋白。通过SDS-PAGE银染,结合Western Blot及液相质谱等对两种蛋白之间是否存在相互作用进行定性分析。
免疫共沉淀技术(Co-IP)是在体外研究蛋白质间相互作用的一种技术。其原理是:抗体A可与蛋白A结合,使A“沉淀”,如果蛋白B与蛋白A相互结合形成复合体,那么抗体A在将蛋白A“沉淀”的同时,也会把蛋白B“沉淀”下来。某科研团队利用该技术研究细胞内三种蛋白α、β、γ间的相互作用,结果如图所示。下列说法中错误的是...
IP:即指免疫沉淀(immunoprecipitation),用相应的抗体来纯化富集目的蛋白,例如图中“IP: Flag”的意思是用Flag标签抗体磁珠去拉Flag,与Flag融合表达的蛋白为诱饵蛋白,此时与该融合蛋白相互作用的其他蛋白都会因此被沉淀下来。IB:即指免疫印迹(immunoblotting)或western blot(WB),用来检测目的蛋白的存在与否,...