摘要: CRISPR/Cas9基因编辑系统目前已经广泛地应用于大肠杆菌工程菌株的构建,若能构建出一种能连续进行基因编辑的CRISPR/Cas9系统,将极大地提高大肠杆菌工程菌株构建的效率。设计并构建了具有自剪切功能的供体质粒pV4,优化了双质粒CRISPR/Cas9基因编辑系统,实现了基因的连续敲除或整合。pV4质粒,在原始供体质粒placZ的...
(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)基因编辑系统已经成功应用于多种微 生物中.由于 CRISPR-Cas9 系统仅受 PAM(protospacer adjacent motif)位点 NGG 的限制,因此理论上 CRISPR-Cas9 系统可以编辑 基因组中任何含 NGG 的位点或基因,但研究发现该系统对影响微生物生长及代谢的关键靶基因改造时会...
Optimization of Escherichia coli CRISPR/Cas9 gene editing system and its application SHAO Meng-yao, LU Fu-ping, ZHU Xin-na, ZHANG Xue-Li 生物学杂志 . 2020, (4): 106 - . DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2020.04.106 版权所有 © 生物学杂志社 通讯地址:安徽省合肥市花园街83号(230001) 电话...
双质粒编辑系统可以解决单质粒构建困难的问题,将Cas9,Red构建在一个质粒上,将目标N20-gRNA, 供体DNA片段构建在另一个质粒上,利用这个双质粒CRISPR/Cas9系统,大肠杆菌单基因编辑的效率达到100%。 本实验室在2016年建立了CRISRP/Cas9单质粒基因编辑系统,单基因编辑效率达到100%。随后,构建了双质粒基因编辑系统[11],实...
近年来,CRISPR-Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)基因编辑系统已经成功应用于多种微生物中。由于CRISPR-Cas9系统仅受PAM(protospacer adjacent motif)位点NGG的限制,因此理论上CRISPR-Cas9系统可以编辑基因组中任何含NGG的位点或基因,但研究发现该系统对影响微生物生长及代谢的关键靶基因改造时...
近年来,CRISPR-Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)基因编辑系统已经成功应用于多种微生物中.由于CRISPR-Cas9系统仅受PAM(protospacer adjacent motif)位点NGG的限制,因此理论上CRISPR-Cas9系统可以编辑基因组中任何含NGG的位点或基因,但研究发现该系统对影响微生物生长及代谢的关键靶基因改造时会...