摘要: CRISPR/Cas9基因编辑系统目前已经广泛地应用于大肠杆菌工程菌株的构建,若能构建出一种能连续进行基因编辑的CRISPR/Cas9系统,将极大地提高大肠杆菌工程菌株构建的效率。设计并构建了具有自剪切功能的供体质粒pV4,优化了双质粒CRISPR/Cas9基因编辑系统,实现了基因的连续敲除或整合。pV4质粒,在原始供体质粒placZ的...
诱导表达引导Cas9蛋白对供体质粒进行自剪切,从而方便下一轮基因的编辑.将pV4系列质粒(敲除或整合)应用于产衣康酸工程菌株的构建,连续敲除ptsI,iclR及整合cad基因,基因编辑结果显示,优化后的双质粒CRISPR/Cas9基因编辑系统,能快速消除供体质粒,实现基因的连续敲除或整合,节约了基因操作的时间,有广泛的工程菌株构建应用...
近年来,CRISPR-Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)基因编辑系统已经成功应用于多种微生物中。由于CRISPR-Cas9系统仅受PAM(protospacer adjacent motif)位点NGG的限制,因此理论上CRISPR-Cas9系统可以编辑基因组中任何含NGG的位点或基因,但研究发现该系统对影响微生物生长及代谢的关键靶基因改造时...
(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)基因编辑系统已经成功应用于多种微 生物中.由于 CRISPR-Cas9 系统仅受 PAM(protospacer adjacent motif)位点 NGG 的限制,因此理论上 CRISPR-Cas9 系统可以编辑 基因组中任何含 NGG 的位点或基因,但研究发现该系统对影响微生物生长及代谢的关键靶基因改造时会...
近年来,CRISPR-Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)基因编辑系统已经成功应用于多种微生物中.由于CRISPR-Cas9系统仅受PAM(protospacer adjacent motif)位点NGG的限制,因此理论上CRISPR-Cas9系统可以编辑基因组中任何含NGG的位点或基因,但研究发现该系统对影响微生物生长及代谢的关键靶基因改造时会...