CRISPR-Cas9是大肠杆菌等细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统,可用来对抗入侵的部分病毒(DNA)及外源DNA.其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。CRISPR--Cas9基因编辑技术是通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列,可以对目标DNA上几乎任何一个位置进行删除或添加特定的...
CRISPR-Cas9基因编辑技术及应用… tracrRNA-crRNA在被融合为单链向导RNA(sgRNA)时也可以发挥指导Cas9的作用。 CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列,并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链,形成双链断裂,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等,最终达到对基因组DNA 进行修...
系统梳理了大肠杆菌中的CRISPR/Cas9技术和CRISPR/dCas9干扰(CRISPRi)系统的最新进展,讨论了CRISPRi系统在提升大肠杆菌代谢物产量方面的最新应用,并强调了该技术的主要挑战和未来前景。
近日,《生物技术通报》在线发表了题为《CRISPR/Cas9介导的adeG基因敲除大肠杆菌细菌模型的建立》的文章。本研究基于RND外排泵基因adeG构建耐药模式菌株,拟通过构建CRISPR/Cas9系统重组质粒,在大肠杆菌中对RND外排系统带来的耐药性进行抑制,...
CRISPR/Cas9基因编辑技术可以在各种生物中实现基因组编辑。英茂盛业采用新研发的大肠杆菌Cas9基因编辑试剂盒(CR3010),实现了敲除BL21菌种中的lacZ(β-半乳糖苷酶)基因,敲除效率高达90%。 实验原理 β-半乳糖苷酶基因是大肠杆菌乳糖代谢途径中的一个酶。β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-...
CRISPR - Cas9 技术作为一种强大的基因编辑工具,已被应用于各种生物体系中,包括大肠杆菌。构建大肠杆菌基因敲除菌株对于研究基因功能、代谢途径以及开发新型生物技术产品具有重要意义。 首先,需要确定要敲除的目标基因。通过对大肠杆菌基因组的分析和研究目的的确定,选择具有重要功能或与特定代谢途径相关的基因进行敲除。
在本月发表在《Cell Reports》杂志上的这项具有里程碑意义的研究中,研究人员能够从生活在小鼠肠道的大肠杆菌中去除大量基因,并改变遍布其消化系统的细菌群落的整体构成。研究人员发表了一篇题为“Phage-delivered CRISPR-Cas9 for strain-specific depletion and genomic deletions in the gut microbiome”的文章: ...
【题目】CRISPR-Cas9是大肠杆菌等细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统,可用来对抗入侵的部分病毒(DNA)及外源DNA.其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。CRISPR--Cas9基因编辑技术是通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列,可以对目标DNA上几乎任何一个位置进行删除或添...
已发现的CRISPR-Cas系统有三种类型:Ⅰ型,Ⅱ型和Ⅲ型,其中以Ⅱ型最为简单,只需一种Cas蛋白,即通过RNA介导核心蛋白Cas9识别并切割靶序列,引起DNA双链断裂[2]。 受自然界中CRISPR-Cas系统的启发,主要对来自于化脓性链球菌(Streptococcuspyogenes)的Ⅱ型CRISPR-Cas系统进行人为改造和利用,目前已经将其发展成为一种新型...