尽管Western Blot实验主要依赖间接标记法，但这种方法能够提供较高的灵敏度和特异性，使得目的蛋白的检测更加准确。通过选择合适的内参蛋白，如β-actin，可以有效提高实验结果的可信度，确保实验数据的真实性和可靠性。
β-Actin与GAPDH内参真的那么靠谱吗?哪种内参最靠谱? 免疫印迹(Western blot, WB)是分子生物学中检测复杂生物提取物中特定蛋白质存在的最常用方法之一。WB必须控制上样量以确保目标蛋白变化具有可比性,通常选…
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes the homing of endothelial progenitor cells to hepatocellular ...
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes the homing of endothelial progenitor cells to hepatocellular ...
在Western Blot实验中，β-Actin抗体常常作为内参指数起着关键的作用。简单来说，它就像一个实验中的参照物，帮助评估目的蛋白的检测结果。以下是它在实验中的几个重要作用：首先，β-Actin作为细胞内的“看家基因”，其表达应该是相对稳定的，因此，如果在检测过程中目的蛋白和β-Actin都未检测到，可能...
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes th...
而beta Actin和beta Tubulin是结构蛋白，不同组织的细胞结构会有差异性。建议事先进行文献查阅和预实验，以确定哪种内参在您的实验条件下最为稳定。没有一个“一刀切”的最佳内参选项，最合适的内参应当基于实验的具体情况来确定。希望这篇指南能帮助您做出明智的选择，确保Western Blot实验结果的可靠性。#蛋白# ...
6 做诱导后样本或检测磷酸化等修饰性抗体时,选择结构蛋白作为内参,如 beta Actin 和 beta Tubulin。因为 GAPDH 是代谢类蛋白,表达量有可能会受到诱导处理的影响。7做 Western Blot 实验时,蛋白上样量和内参的条带强度也要适当控制。内参条带不要过度曝光。如果内参条带过度曝光,掩盖样本之间含量差异,妨碍对条带...
β-actin抗体是Western Blot很好的内参指数，意味着它在蛋白质研究中有着重要作用。详细解释如下：一、β-actin抗体的作用 在Western Blot实验中，β-actin抗体常被用作内参指数。内参是用于标准化实验过程，确保实验结果的可靠性与准确性的重要参照物。β-actin作为一种在大多数细胞中稳定表达的蛋白质，...
▲4. 做诱导后样本或检测磷酸化等修饰性抗体时,选择结构蛋白作为内参,如 beta Actin 和 beta Tubulin。因为 GAPDH 是代谢类蛋白,表达量有可能会受到诱导处理的影响。同时,做修饰性抗体的 Western Blot 实验,最好也带上同抗原的总抗作为阳性对照。 ▲5. 做 Western Blot 实验时,内参的条带强度也要适当控制。不...