α-actin和β-actin在western blot中一直被用作内参。肌动蛋白在细胞中浓度很高,因此为了检测到肌动蛋白量的任何变化,调整上样体积和蛋白质印迹操作流程是很重要的。 细胞生长条件的改变会破坏肌动蛋白的合成。有报道表明beta肌动蛋白在蛋白质印迹分析中可能不是一个可靠的内参。beta肌动蛋白也存在于核内,作为染色...
不论是Western blot还是qPCR,内参的设置首先能够反映出实验过程是不是正常,包括电泳、转膜、发光这些步骤有没有问题。这个时候,内参的作用是充当空白对照。 其次我们再谈定量的问题:我们跑Western blot除了想知道目的蛋白在细胞/组织中是否表达,更重要的是想知道表达量的高低。Western blot条带的灰度值能够帮我们判断目...
β-actin是一种细胞骨架蛋白，在细胞中具有高度保守的表达。它参与了细胞的多种功能，包括细胞运动、分裂等。在Western blot实验中，β-actin也经常作为内参使用，其分子量大约为42kDa左右。β-actin的表达相对稳定，因此其在蛋白质表达研究中也常被用作对照。这两个蛋白由于其特性，在生物...
尽管Western Blot实验主要依赖间接标记法，但这种方法能够提供较高的灵敏度和特异性，使得目的蛋白的检测更加准确。通过选择合适的内参蛋白，如β-actin，可以有效提高实验结果的可信度，确保实验数据的真实性和可靠性。
而beta Actin和beta Tubulin是结构蛋白，不同组织的细胞结构会有差异性。建议事先进行文献查阅和预实验，以确定哪种内参在您的实验条件下最为稳定。没有一个“一刀切”的最佳内参选项，最合适的内参应当基于实验的具体情况来确定。希望这篇指南能帮助您做出明智的选择，确保Western Blot实验结果的可靠性。#蛋白# ...
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes th...
4. 做诱导后样本或检测磷酸化等修饰性抗体时,选择结构蛋白作为内参,如beta Actin和beta Tubulin。因为GAPDH是代谢类蛋白,表达量有可能会受到诱导处理的影响。同时,做修饰性抗体的Western Blot实验,最好也带上同抗原的总抗作为阳性对照。 5. 做Western Blot实验时,内参...
在Western Blot实验中，β-Actin抗体常常作为内参指数起着关键的作用。简单来说，它就像一个实验中的参照物，帮助评估目的蛋白的检测结果。以下是它在实验中的几个重要作用：首先，β-Actin作为细胞内的“看家基因”，其表达应该是相对稳定的，因此，如果在检测过程中目的蛋白和β-Actin都未检测到，可能...
β-actin抗体是Western Blot很好的内参指数，意味着它在蛋白质研究中有着重要作用。详细解释如下：一、β-actin抗体的作用 在Western Blot实验中，β-actin抗体常被用作内参指数。内参是用于标准化实验过程，确保实验结果的可靠性与准确性的重要参照物。β-actin作为一种在大多数细胞中稳定表达的蛋白质，...
所谓内参就是内部参照的意思。－－Western的抗体通常分为一抗和二抗，一抗结合目的蛋白，这是Western变化...