其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes the homing of endothelial progenitor cells to hepatocellular ...
α-actin和β-actin在western blot中一直被用作内参。肌动蛋白在细胞中浓度很高,因此为了检测到肌动蛋白量的任何变化,调整上样体积和蛋白质印迹操作流程是很重要的。 细胞生长条件的改变会破坏肌动蛋白的合成。有报道表明beta肌动蛋白在蛋白质印迹分析中可能不是一个可靠的内参。beta肌动蛋白也存在于核内,作为染色...
尽管Western Blot实验主要依赖间接标记法，但这种方法能够提供较高的灵敏度和特异性，使得目的蛋白的检测更加准确。通过选择合适的内参蛋白，如β-actin，可以有效提高实验结果的可信度，确保实验数据的真实性和可靠性。
在Western Blot实验中，选择合适的内参蛋白对于确保实验结果的准确性至关重要。今天小曼带小伙伴们探讨三种常用的内参蛋白——GAPDH、Tubulin和Actin，并指导您如何根据实验条件选择最合适的内参。GAPDH GAPDH是在细胞代谢糖酵解中起关键作用的酶，分子量36kDa，通常表达量较高，在同种细胞或组织中的表达量一般是恒定的...
Western内参使用的GAPDH和β-actin蛋白的分子量分别为：GAPDH的分子量约为36kDa左右。β-actin蛋白的分子量约为42kDa左右。以下是 GAPDH是一种在大多数细胞中表达丰富的酶，参与糖酵解过程。它在Western blot分析中经常作为内参使用，分子量大约为36kDa。由于其广泛表达和稳定的表达量，GAPDH作为...
6 做诱导后样本或检测磷酸化等修饰性抗体时,选择结构蛋白作为内参,如 beta Actin 和 beta Tubulin。因为 GAPDH 是代谢类蛋白,表达量有可能会受到诱导处理的影响。7做 Western Blot 实验时,蛋白上样量和内参的条带强度也要适当控制。内参条带不要过度曝光。如果内参条带过度曝光,掩盖样本之间含量差异,妨碍对条带...
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes the homing of endothelial progenitor cells to hepatocellular ...
在Western Blot实验中，β-Actin抗体常常作为内参指数起着关键的作用。简单来说，它就像一个实验中的参照物，帮助评估目的蛋白的检测结果。以下是它在实验中的几个重要作用：首先，β-Actin作为细胞内的“看家基因”，其表达应该是相对稳定的，因此，如果在检测过程中目的蛋白和β-Actin都未检测到，可能...
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes th...
在Western Blot实验中，β-actin抗体常被用作内参指数。内参是用于标准化实验过程，确保实验结果的可靠性与准确性的重要参照物。β-actin作为一种在大多数细胞中稳定表达的蛋白质，其表达水平相对较高且恒定，因此是Western Blot实验中常用的内参蛋白之一。通过检测β-actin的表达水平，可以对比目标蛋白的...