其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes th...
1、总蛋白或者胞质蛋白内参(定位于细胞质)主要包括以下3类: β-actin(肌动蛋白):β-actin广泛存在于不同类型的细胞中,分子量约为42 kDa,主要位于细胞质中,是一种结构蛋白,参与细胞骨架的构建和细胞的运动等功能。 GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶):GAPDH参与细胞糖酵解途径中的反应,分子量约为36 kDa,位于细胞质...
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes the homing of endothelial progenitor cells to hepatocellular ...
Western Blot 实验方案整理。常用内参 β-actin,GAPDH,β-tubulin为三大常用内参。 β-actin,肌动蛋白,细胞骨架蛋白。在各组织和细胞中的表达相对恒定,它广泛分布于细胞质内,表达量非常丰富。 GAPDH,甘油醛-3-磷酸脱氢酶,该酶是糖酵解反应中的一个酶,几乎在所有组织细胞中都高水平表达,在同种细胞或组织中的表达...
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes the homing of endothelial progenitor cells to hepatocellular ...
选择内参抗体时,应该考虑目的蛋白分子量的大小。通常应该保证目的蛋白与内参蛋白分子量相差5KDa以上。比如检测目的蛋白分子量为45KDa,此时不适宜选择β-actin(42KDa)作为内参,可以考虑选择GAPDH(36KDa)作为内参。 二、种属 不同种属的样本内参蛋白不同。
解析 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-Actin做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-Actin起到几个作用:1、如果目...结果一 题目 β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数,是啥意思?β-Actin在整个Western ...
▲4. 做诱导后样本或检测磷酸化等修饰性抗体时,选择结构蛋白作为内参,如 beta Actin 和 beta Tubulin。因为 GAPDH 是代谢类蛋白,表达量有可能会受到诱导处理的影响。同时,做修饰性抗体的 Western Blot 实验,最好也带上同抗原的总抗作为阳性对照。 ▲5. 做 Western Blot 实验时,内参的条带强度也要适当控制。不...
解答一 举报 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-Actin做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-Actin起到几个作用:1、如果目... 解析看不懂?免费查看同类题视频解析查看解答 更多答案(1) ...
在Western Blot实验中，β-actin抗体常被用作内参指数。内参是用于标准化实验过程，确保实验结果的可靠性与准确性的重要参照物。β-actin作为一种在大多数细胞中稳定表达的蛋白质，其表达水平相对较高且恒定，因此是Western Blot实验中常用的内参蛋白之一。通过检测β-actin的表达水平，可以对比目标蛋白的...