β-Actin与GAPDH内参真的那么靠谱吗?哪种内参最靠谱? 免疫印迹(Western blot, WB)是分子生物学中检测复杂生物提取物中特定蛋白质存在的最常用方法之一。WB必须控制上样量以确保目标蛋白变化具有可比性,通常选…
② 矫正实验误差。在Western Blot实验过程中,从样品制备、蛋白质提取、蛋白电泳到转膜、抗体孵育等多个步骤中均可能引入技术误差。内参蛋白可以用来指示这些操作步骤中可能出现的误差情况,确保实验数据的科学性。③ 蛋白的相对定量分析。在做Western Blot实验结果分析时,通常会将目的蛋白的信号强度和内参蛋白的信号强度...
音乐 美食 展开 还有人不知道Western blot实验内参基因 >Actin内参基因内参基因Actin选择和注意事项1).研究模型是心肌,骨骼肌或者平滑肌(这些组织有特异的actin)2).肌肉组织(由于肌肉组织中β-actin分布很少,不易检测)3).细胞或肿瘤恶化时,B-actin 的表达水平异常4).细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用B-acti...
在Western blot实验中,我们通常需要检测不同处理条件下的蛋白质含量变化,但由于实验条件等因素的影响,不同样品中蛋白质总量可能会存在差异,因此需要使用内参进行标准化。使用内参可以消除实验条件等因素的影响,从而准确地比较不同样品中待检测蛋白的含量变化。通俗地讲,假设我们检测到各组间目标蛋白的信号强度明显不同,...
l哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、NaK、Atpase等。 l植物来源实验样本,则可以选择plant actin、Rubisco等。 l根据来源样本选择不同的内参,是WB实验成功的关键。也可参照文献报导,选择合适的蛋白作为内参。
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes the homing of endothelial progenitor cells to hepatocellular ...
GAPDH的分子量约为36kDa左右。β-actin蛋白的分子量约为42kDa左右。以下是 GAPDH是一种在大多数细胞中表达丰富的酶,参与糖酵解过程。它在Western blot分析中经常作为内参使用,分子量大约为36kDa。由于其广泛表达和稳定的表达量,GAPDH作为内参蛋白可以帮助研究者对实验结果进行标准化和比较。β...
Western 内参使用的GAPDH和B-actin蛋白的分子量分别为:1. GAPDH的分子量约为36kDa。2. B-actin的分子量约为42kDa。解释:GAPDH是一种在细胞代谢中起关键作用的酶,广泛存在于各种生物体中。其分子量约为36kDa,这在蛋白质分子量中属于中等大小。在Western Blot分析中,GAPDH常作为内参蛋白使用,用于...
β-Actin与GAPDH内参真的那么靠谱吗?哪种内参最靠谱? 免疫印迹(Western blot, WB)是分子生物学中检测复杂生物提取物中特定蛋白质存在的最常用方法之一。WB必须控制上样量以确保目标蛋白变化具有可比性,通常选择在所有组织中普遍分布的具有相对恒定量的蛋白质作为内参(Loa...
在Western Blot实验中,内参蛋白GAPDH和B-actin扮演着关键角色。GAPDH的分子量约为146千道尔顿(KD),在检测条带上通常显示出36kD的信号。而B-actin的分子量更低,为42KD。这些内参蛋白的存在对于实验的准确性和可比性至关重要,因为它们作为参照标准,确保在不同条件或组织中对比目的蛋白表达时,样本量...