β-Actin与GAPDH内参真的那么靠谱吗?哪种内参最靠谱? 免疫印迹(Western blot, WB)是分子生物学中检测复杂生物提取物中特定蛋白质存在的最常用方法之一。WB必须控制上样量以确保目标蛋白变化具有可比性,通常选…
② 矫正实验误差。在Western Blot实验过程中,从样品制备、蛋白质提取、蛋白电泳到转膜、抗体孵育等多个步骤中均可能引入技术误差。内参蛋白可以用来指示这些操作步骤中可能出现的误差情况,确保实验数据的科学性。③ 蛋白的相对定量分析。在做Western Blot实验结果分析时,通常会将目的蛋白的信号强度和内参蛋白的信号强度...
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes the homing of endothelial progenitor cells to hepatocellular ...
.研究模型是心肌,骨骼肌或者平滑肌(这些组织有特异的actin)2).肌肉组织(由于肌肉组织中β-actin分布很少,不易检测)3).细胞或肿瘤恶化时,B-actin 的表达水平异常4).细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用B-actin5).某些特殊组织(脂肪细胞,肝脏)或者内脏,B-actin蛋白并不稳定#医学生#手册#WB#WB实验#细胞...
l哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、NaK、Atpase等。 l植物来源实验样本,则可以选择plant actin、Rubisco等。 l根据来源样本选择不同的内参,是WB实验成功的关键。也可参照文献报导,选择合适的蛋白作为内参。
Western 内参使用的GAPDH和B-actin蛋白的分子量分别为:1. GAPDH的分子量约为36kDa。2. B-actin的分子量约为42kDa。解释:GAPDH是一种在细胞代谢中起关键作用的酶,广泛存在于各种生物体中。其分子量约为36kDa,这在蛋白质分子量中属于中等大小。在Western Blot分析中,GAPDH常作为内参蛋白使用,用于...
GAPDH的分子量约为36kDa左右。β-actin蛋白的分子量约为42kDa左右。以下是 GAPDH是一种在大多数细胞中表达丰富的酶,参与糖酵解过程。它在Western blot分析中经常作为内参使用,分子量大约为36kDa。由于其广泛表达和稳定的表达量,GAPDH作为内参蛋白可以帮助研究者对实验结果进行标准化和比较。β...
β-Actin是PCR常用的内参,β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数。内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白。它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。常用的蛋白质内参有细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin和GAPDH...
β-Actin与GAPDH内参真的那么靠谱吗?哪种内参最靠谱? 免疫印迹(Western blot, WB)是分子生物学中检测复杂生物提取物中特定蛋白质存在的最常用方法之一。WB必须控制上样量以确保目标蛋白变化具有可比性,通常选择在所有组织中普遍分布的具有相对恒定量的蛋白质作为内参(Loa...
α-actin和β-actin在western blot中一直被用作内参。肌动蛋白在细胞中浓度很高,因此为了检测到肌动蛋白量的任何变化,调整上样体积和蛋白质印迹操作流程是很重要的。 细胞生长条件的改变会破坏肌动蛋白的合成。有报道表明beta肌动蛋白在蛋白质印迹分析中可能不是一个可靠的内参。beta肌动蛋白也存在于核内,作为染色...