GAPDH GAPDH是在细胞代谢糖酵解中起关键作用的酶,分子量36kDa,通常表达量较高,在同种细胞或组织中的表达量一般是恒定的,且很少受外部诱导物的影响。然而,在某些特定条件下,比如缺氧和糖尿病等疾病存在时,其表达可能会发生变化,因此在这些情况下不推荐作为内参。Actin Actin(最常用β-actin)是构成细胞骨架...
在Western Blot实验中,β-Actin抗体常常作为内参指数起着关键的作用。简单来说,它就像一个实验中的参照物,帮助评估目的蛋白的检测结果。以下是它在实验中的几个重要作用:首先,β-Actin作为细胞内的“看家基因”,其表达应该是相对稳定的,因此,如果在检测过程中目的蛋白和β-Actin都未检测到,可能意...
内参的主要作用在于提供一个内部对照,帮助分析实验数据的可靠性。Western Blot实验通常包含一抗和二抗两个步骤。一抗特异性地结合目的蛋白,是实验中最关键的部分,因为它直接影响到结果的准确性。而二抗则具有高度的通用性,通常带有荧光或酶标记,用于放大一抗的信号,从而使得检测结果更加明显。尽管Wester...
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes the homing of endothelial progenitor cells to hepatocellular ...
(1)脂肪组织:β-Actin的表达量非常低,不适合作为内参。 (2)多组织多细胞样本对比:GAPDH 作为代谢类蛋白,在活组织中表达比较恒定,因此多组织多细胞样本对比时,建议选用 GAPDH 作内参[6]。β-Actin 和β-Tubulin 等结构蛋白在不同组织中会有表达差异。
详细解释如下:一、β-actin抗体的作用 在Western Blot实验中,β-actin抗体常被用作内参指数。内参是用于标准化实验过程,确保实验结果的可靠性与准确性的重要参照物。β-actin作为一种在大多数细胞中稳定表达的蛋白质,其表达水平相对较高且恒定,因此是Western Blot实验中常用的内参蛋白之一。通过检测β...
内参就是内部参照,一般是指管家基因编码表达的蛋白,它们在各个组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照参。内参则可以校正蛋白质定量、上样过程中存在的误差,保证实验结果的准确性。 此外,内参可以作为空白对照,还可以检测蛋白转膜情况是否完全、整个WB显色发光体系是否正常。内参抗体种类很...
.研究模型是心肌,骨骼肌或者平滑肌(这些组织有特异的actin)2).肌肉组织(由于肌肉组织中β-actin分布很少,不易检测)3).细胞或肿瘤恶化时,B-actin 的表达水平异常4).细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用B-actin5).某些特殊组织(脂肪细胞,肝脏)或者内脏,B-actin蛋白并不稳定#医学生#手册#WB#WB实验#细胞...
解析 描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-Actin做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-Actin起到几个作用:1、如果目...结果一 题目 β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数,是啥意思?β-Actin在整个Western ...