GAPDH GAPDH是在细胞代谢糖酵解中起关键作用的酶，分子量36kDa，通常表达量较高，在同种细胞或组织中的表达量一般是恒定的，且很少受外部诱导物的影响。然而，在某些特定条件下，比如缺氧和糖尿病等疾病存在时，其表达可能会发生变化，因此在这些情况下不推荐作为内参。Actin Actin（最常用β-actin）是构成细胞骨架...
其次我们要明确待检测基因的亚细胞定位,跑细胞总蛋白的Western blot一般用β-actin和Tubulin等细胞内较稳定表达的蛋白作为内参没什么毛病,但是核蛋白的内参要考虑用Lamin A,Lamin B,histone H3等;膜蛋白的内参一般用N-Cadherin。 EphA1 activation promotes th...
内参是western blot法非常重要而必须的部分。它保证了目的蛋白表达量的相对多少。内参是指由细胞中管家基因编码的蛋白,其在各组织细胞中的表达相对稳定,因此在测定目的蛋白的相对水平时常用它做对照物。 一、内参介绍 哺乳动物细胞中常用的内参很多且分布广泛: 全细胞或细胞浆中---tubulin (微管蛋白), actin (肌动...
在Western Blot实验中，β-Actin抗体常常作为内参指数起着关键的作用。简单来说，它就像一个实验中的参照物，帮助评估目的蛋白的检测结果。以下是它在实验中的几个重要作用：首先，β-Actin作为细胞内的“看家基因”，其表达应该是相对稳定的，因此，如果在检测过程中目的蛋白和β-Actin都未检测到，可能意...
一、β-actin抗体的作用 在Western Blot实验中，β-actin抗体常被用作内参指数。内参是用于标准化实验过程，确保实验结果的可靠性与准确性的重要参照物。β-actin作为一种在大多数细胞中稳定表达的蛋白质，其表达水平相对较高且恒定，因此是Western Blot实验中常用的内参蛋白之一。通过检测β-actin的表达...
Western Blot实验中内参蛋白的选择是关键，常见的有GAPDH、Tubulin和Actin。GAPDH，作为糖酵解过程中的关键酶，分子量36kDa，表达稳定但可能在特殊条件下如缺氧、糖尿病时变化，不推荐这些情况下的内参。Actin，尤其是β-actin，作为细胞骨架蛋白，42kDa，广泛存在于真核细胞中，适合全细胞和细胞质样品标准...
内参就是内部参照,一般是指管家基因编码表达的蛋白,它们在各个组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照参。内参则可以校正蛋白质定量、上样过程中存在的误差,保证实验结果的准确性。 此外,内参可以作为空白对照,还可以检测蛋白转膜情况是否完全、整个WB显色发光体系是否正常。内参抗体种类很...
β-Actin与GAPDH内参真的那么靠谱吗? 哪种内参最靠谱? 免疫印迹(Western blot, WB)是分子生物学中检测复杂生物提取物中特定蛋白质存在的最常用方法之一。WB必须控制上样量以确保目标蛋白变化具有可比性,通常选择在所有组织中普遍分布的具有相对恒定量的蛋白质作为内参(Loading control)。
β-Actin与GAPDH内参真的那么靠谱吗?哪种内参最靠谱? 免疫印迹(Western blot, WB)是分子生物学中检测复杂生物提取物中特定蛋白质存在的最常用方法之一。WB必须控制上样量以确保目标蛋白变化具有可比性,通常选择在所有组织中普遍分布的具有相对恒定量的蛋白质作为内参(Loading control)。