THP-1诱导完成后可通过流式和免疫荧光、ELISA或特异性标记物(如IL1、IL10、精氨酸酶)的基因表达分析来评估向M1和M2型巨噬细胞的正确分化,并且从形态上也可以看出来,都是最基础的鉴定方法,这就不一一述来了。 PMA刺激后的THP-1 THP-1细胞的诱导的M1形态(PMA) Thp-1细胞诱导的M2形态(PMA) THP-1诱导并不...
THP-1是人急性单核细胞白血病细胞,是单核-巨噬细胞相关研究中的常用细胞系工具,可通过PMA(佛波酯)诱导分化为M0型巨噬细胞,然后根据实验需求进一步诱导为M1或M2型巨噬细胞。 细胞形态:悬浮细胞,圆形,大小均一,小而透亮(下图Fig1来自ATCC网站)。 注意:显微镜下观察之前,可以轻轻晃动培养瓶或孔板,静置片刻后使得细胞...
thp-1诱导向m1极化实验步骤 通过实验可以有效诱导THP-1细胞向M1巨噬细胞极化。本文将详细介绍THP-1细胞的培养、诱导向M1巨噬细胞极化的步骤,以及相关的实验控制。该实验步骤包括培养条件的设定、细胞处理、细胞相关试验和数据分析。 1. THP-1细胞培养 - THP-1细胞的培养基为RPMI 1640,加入10%胎牛血清(FBS)和1%...
首先,THP-1诱导分化为巨噬细胞这个实验真的是很难做,THP-1是本实验最大的变量,以本人经验 1.M1诱导是比较稳定的,CD86表达85%以上,CD86的极化程度和LPS浓度相关2.M2比较难诱导,比例10%左右,文献报道,降低PMA的浓度、M0后静息,有利于M2方向诱导3.细胞因子严格分装,勿反复冻融,以减少实验的干扰项4.实在不行,...
THP-1极化进入M1和M2巨噬细胞图 M1型形态多样,伪足较多,分叉明显,M2型形态均一,多呈长条型,分叉不明显。M1和M2型鉴定 上述形态是初步的鉴别方法,更准确的可以通过流式细胞术一般是通过一些巨噬细胞标志物进行的,常见的M1巨噬细胞标志物有CD68、CD80、CD86、CD32等;常见M2巨噬细胞标志物有CD206、CD204、...
THP-1细胞,这是一种可以分化为巨噬细胞的人类白血病单核细胞系。这允许在无直接细胞接触交互作用的情况下,研究巨噬细胞分泌体对共培养癌症细胞的影响(例如,对生长、药物反应或基因表达的影响),体外THP-1单核细胞分化为极化巨噬细胞用于研究M1和M2型巨噬细胞群体对其他细胞的影响,M1型巨噬细胞通常被认为是抑制肿瘤...
3. M1极化 -收集活化的THP-1细胞。 -在离心管中,以适当的转速和时间将细胞离心沉淀。 -弃去上清液,用适当的缓冲液(例如,PBS)洗涤沉淀的细胞。 -重复上述步骤,以确保细胞表面没有残留的活化剂。 4. THP-1向M1细胞的分化验证 -取一部分沉淀的THP-1细胞,制备细胞涂片。 -使用适当的标记方法(例如,荧光染料或...
需要注意的是,THP-1细胞系的一个特点是诱导或亚型极化后,marker并不是独特表达的。例如,CD206在M0、M1中都有表达。基因水平的差异比较显著,CD206的FC和ELISA中的IL1b、IL6差异也比较显著。 RAW264.7与THP-1的区别 🐭另外,RAW264.7也是单核巨噬细胞系,但它是小鼠源的,而THP-1是人源的。同学们千万不要搞...
THP-1细胞系在研究炎症和免疫方向的应用中,通过特定条件诱导分化为M1型和M2型巨噬细胞。M1型巨噬细胞在炎症反应中扮演关键角色,通过释放趋化因子和促炎因子介导炎症反应;而M2型巨噬细胞则参与损伤组织修复和纤维化,通过释放抑炎因子发挥作用。这一特性使THP-1细胞成为研究炎症和免疫机制的理想工具。TH...
THP-1极化进入M1和M2巨噬细胞图 M1型形态多样,伪足较多,分叉明显,M2型形态均一,多呈长条型,分叉不明显。 M1和M2型鉴定 上述形态是初步的鉴别方法,更准确的可以通过流式细胞术一般是通过一些巨噬细胞标志物进行的,常见的M1巨噬细胞标志物有CD68、CD80、CD86、CD32等;常见M2巨噬细胞标志物有CD206、CD204、CD16...