THP-1诱导完成后可通过流式和免疫荧光、ELISA或特异性标记物(如IL1、IL10、精氨酸酶)的基因表达分析来评估向M1和M2型巨噬细胞的正确分化,并且从形态上也可以看出来,都是最基础的鉴定方法,这就不一一述来了。 PMA刺激后的THP-1 THP-1细胞的诱导的M1形态(PMA) Thp-1细胞诱导的M2形态(PMA) THP-1诱导并不...
用PMA孵育THP-1细胞48h，显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它们的形态由圆形变为细长和扁平。巨噬细胞进一步诱导成M1型实验步骤：（1）诱导培养基的配置：向1640完全培养基（含胎牛血清）里加入PMA（诱导浓度：100ng/mL）、脂多糖(LPS)(诱导浓度：100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓...
thp-1诱导向m1极化实验步骤 通过实验可以有效诱导THP-1细胞向M1巨噬细胞极化。本文将详细介绍THP-1细胞的培养、诱导向M1巨噬细胞极化的步骤,以及相关的实验控制。该实验步骤包括培养条件的设定、细胞处理、细胞相关试验和数据分析。 1. THP-1细胞培养 - THP-1细胞的培养基为RPMI 1640,加入10%胎牛血清(FBS)和1%...
THP-1是人急性单核细胞白血病细胞,是单核-巨噬细胞相关研究中的常用细胞系工具,可通过PMA(佛波酯)诱导分化为M0型巨噬细胞,然后根据实验需求进一步诱导为M1或M2型巨噬细胞。 细胞形态:悬浮细胞,圆形,大小均一,小而透亮(下图Fig1来自ATCC网站)。 注意:显微镜下观察之前,可以轻轻晃动培养瓶或孔板,静置片刻后使得细胞...
2. M1型巨噬细胞极化(经典激活) 诱导剂:LPS (脂多糖) 和 IFN-γ (干扰素-γ) 步骤: 使用PMA诱导分化后的THP-1细胞。 在培养基中添加100 ng/mL LPS和20 ng/mL IFN-γ。 继续培养24至48小时。 M1型巨噬细胞具有增强的杀菌和促炎作用,可以通过检测TNF-α、IL-6等标志物来验证极化效果。
THP-1细胞,这是一种可以分化为巨噬细胞的人类白血病单核细胞系。这允许在无直接细胞接触交互作用的情况下,研究巨噬细胞分泌体对共培养癌症细胞的影响(例如,对生长、药物反应或基因表达的影响),体外THP-1单核细胞分化为极化巨噬细胞用于研究M1和M2型巨噬细胞群体对其他细胞的影响,M1型巨噬细胞通常被认为是抑制肿瘤...
3. M1极化 -收集活化的THP-1细胞。 -在离心管中,以适当的转速和时间将细胞离心沉淀。 -弃去上清液,用适当的缓冲液(例如,PBS)洗涤沉淀的细胞。 -重复上述步骤,以确保细胞表面没有残留的活化剂。 4. THP-1向M1细胞的分化验证 -取一部分沉淀的THP-1细胞,制备细胞涂片。 -使用适当的标记方法(例如,荧光染料或...
为了成功地将THP-1细胞诱导成M0巨噬细胞,并随后将其极化为M1或M2巨噬细胞,需要考虑以下几个关键因素和方法: THP-1细胞向M0巨噬细胞的分化 1.PMA诱导:通常使用佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞分化为巨噬细胞样细胞。常用方法是将THP-1细胞与150 nM的PMA孵育24小时。之后,将细胞在RPMI培养基中继续培养24小时,以...
M0巨噬细胞通常处于静息状态,如果需要进一步分化为M1(促炎性)或M2(抗炎性)巨噬细胞,则可通过加入IFN-γ、LPS(M1)或IL-4(M2)进行进一步诱导。 THP-1细胞诱导成树突状细胞(DC) 培养THP-1细胞:与诱导M0相同,将THP-1细胞在10% FBS的RPMI-1640培养基中培养。
THP-1极化进入M1和M2巨噬细胞图 M1型形态多样,伪足较多,分叉明显,M2型形态均一,多呈长条型,分叉不明显。 M1和M2型鉴定 上述形态是初步的鉴别方法,更准确的可以通过流式细胞术一般是通过一些巨噬细胞标志物进行的,常见的M1巨噬细胞标志物有CD68、CD80、CD86、CD32等;常见M2巨噬细胞标志物有CD206、CD204、CD16...