用PMA孵育THP-1细胞48h,显示THP-1(40X)在(A)诱导前(B)诱导后的形态学变化。它们的形态由圆形变为细长和扁平。巨噬细胞进一步诱导成M1型实验步骤:(1)诱导培养基的配置:向1640完全培养基(含胎牛血清)里加入PMA(诱导浓度:100ng/mL)、脂多糖(LPS)(诱导浓度:100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓...
THP-1诱导完成后可通过流式和免疫荧光、ELISA或特异性标记物(如IL1、IL10、精氨酸酶)的基因表达分析来评估向M1和M2型巨噬细胞的正确分化,并且从形态上也可以看出来,都是最基础的鉴定方法,这就不一一述来了。 PMA刺激后的THP-1 THP-1细胞的诱导的M1形态(PMA) Thp-1细胞诱导的M2形态(PMA) THP-1诱导并不...
THP-1极化进入M1和M2巨噬细胞图 M1型形态多样,伪足较多,分叉明显,M2型形态均一,多呈长条型,分叉不明显。 M1和M2型鉴定 上述形态是初步的鉴别方法,更准确的可以通过流式细胞术一般是通过一些巨噬细胞标志物进行的,常见的M1巨噬细胞标志物有CD68、CD80、CD86、CD32等;常见M2巨噬细胞标志物有CD206、CD204、CD16...
THP-1细胞用途—巨噬细胞分化 THP-1可以被诱导分化为巨噬细胞M1和M2,并释放相应的细胞因子[1,2];THP-1首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,随后进行下一步极化:巨噬细胞M1极化:通过脂多糖(LPS)和IFN-γ诱导M1极化,释放出TNF-α、IL-6等细胞因子,这是典型的炎症模型。巨噬细胞M2极化:通过 IL-4...
thp-1诱导向m1极化实验步骤 通过实验可以有效诱导THP-1细胞向M1巨噬细胞极化。本文将详细介绍THP-1细胞的培养、诱导向M1巨噬细胞极化的步骤,以及相关的实验控制。该实验步骤包括培养条件的设定、细胞处理、细胞相关试验和数据分析。 1. THP-1细胞培养 - THP-1细胞的培养基为RPMI 1640,加入10%胎牛血清(FBS)和1%...
-收集活化的THP-1细胞。 -在离心管中,以适当的转速和时间将细胞离心沉淀。 -弃去上清液,用适当的缓冲液(例如,PBS)洗涤沉淀的细胞。 -重复上述步骤,以确保细胞表面没有残留的活化剂。 4. THP-1向M1细胞的分化验证 -取一部分沉淀的THP-1细胞,制备细胞涂片。 -使用适当的标记方法(例如,荧光染料或抗体标记)标记...
为了成功地将THP-1细胞诱导成M0巨噬细胞,并随后将其极化为M1或M2巨噬细胞,需要考虑以下几个关键因素和方法: THP-1细胞向M0巨噬细胞的分化 1.PMA诱导:通常使用佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞分化为巨噬细胞样细胞。常用方法是将THP-1细胞与150 nM的PMA孵育24小时。之后,将细胞在RPMI培养基中继续培养24小时,以...
M1型巨噬细胞富含溶酶体颗粒,可通过反应性中间物(ROI)、一氧化氮(NO)和释放溶酶体酶杀伤清楚病原体,并合成分泌MCP-1、CCL3、CXCL8等趋化因子和IL-1β、IL-6、TNF-α等促炎因子介导产生炎症反应。所以THP-1细胞来源的M1型巨噬细胞是一种典型的炎症模型。而M2型巨噬细胞可合成分泌IL-10、TGF-β等因子,...
THP-1来源的M1型巨噬...细胞的凋亡、增殖与迁移作用_杨银银 (1) 格式:PDF 页数:7 上传日期:2022-04-12 09:43:32 浏览次数:203 下载积分:2000 加入阅读清单 97% 还剩6 页未读,是否继续阅读? 此文档由 dvrg01f28 分享于 2022-04-12 请拖动滑块继续阅读 不看了,直接下载...
THP-1细胞培养 THP-1是人急性单核细胞白血病细胞,是单核-巨噬细胞相关研究中的常用细胞系工具,可通过PMA(佛波酯)诱导分化为M0型巨噬细胞,然后根据实验需求进一步诱导为M1或M2型巨噬细胞。 细胞形态:悬浮细胞,圆形,大小均一,小而透亮(下图Fig1来自ATCC网站)。