巨噬细胞被分为两种主要类型:M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞。THP-1细胞通常用佛波酯(PMA)(abs9107)诱导分化为巨噬细胞,然后在PMA仍然存在的情况下:加入脂多糖(LPS)(诱导浓度:100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓度:20ng/mL)(abs04123)培养48h,诱导其向M1极化;加入IL-4(诱导浓度:20ng/mL)(abs04...
thp-1诱导向m1极化实验步骤 通过实验可以有效诱导THP-1细胞向M1巨噬细胞极化。本文将详细介绍THP-1细胞的培养、诱导向M1巨噬细胞极化的步骤,以及相关的实验控制。该实验步骤包括培养条件的设定、细胞处理、细胞相关试验和数据分析。 1. THP-1细胞培养 - THP-1细胞的培养基为RPMI 1640,加入10%胎牛血清(FBS)和1%...
(1)诱导培养基的配置:向1640完全培养基(含胎牛血清)里加入PMA(诱导浓度:100ng/mL)、脂多糖(LPS)(诱导浓度:100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓度:20ng/mL)(abs04123),制成诱导培养基。 (2)诱导培养:将已经诱导成的巨噬细胞上清弃除,加入诱导培养基(6孔板,每孔2mL)培养48h,诱导其向M1极化。48h后...
(1)诱导培养基的配置:向1640完全培养基(含胎牛血清)里加入PMA(诱导浓度:100ng/mL)、脂多糖(LPS)(诱导浓度:100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓度:20ng/mL)(abs04123),制成诱导培养基; (2)诱导培养:将已经诱导成的巨噬细胞上清弃除,加入诱导培养基(6孔板,每孔2mL)培养48h,诱导其向M1极化。48h后,...
为了成功地将THP-1细胞诱导成M0巨噬细胞,并随后将其极化为M1或M2巨噬细胞,需要考虑以下几个关键因素和方法: THP-1细胞向M0巨噬细胞的分化 1.PMA诱导:通常使用佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞分化为巨噬细胞样细胞。常用方法是将THP-1细胞与150 nM的PMA孵育24小时。之后,将细胞在RPMI培养基中继续培养24小时,以...
-将培养的THP-1细胞洗涤一次,以去除培养基中的杂质。-在细胞培养器中添加适当的活化剂(例如,细胞因子)来刺激THP-1细胞的极化。-按照实验要求和时间表,确定适当的活化剂浓度和培养时间。3. M1极化 -收集活化的THP-1细胞。-在离心管中,以适当的转速和时间将细胞离心沉淀。-弃去上清液,用适当的缓冲液(例如...
THP-1细胞通常用佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,然后在PMA仍然存在的情况下: 脂多糖(LPS)(100ng/mL)、IFN-γ(20ng/mL)培养48h,诱导其向M1极化; IL-4(20ng/mL)、IL-13(20ng/mL)培养48h,诱导其向M2极化; 最后,在无刺激物和无PMA的情况下,用无血清RPMI-1640培养基重悬细胞,可保持72h。
巨噬细胞被分为两种主要类型:M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞。THP-1细胞通常用佛波酯(PMA)(abs9107)诱导分化为巨噬细胞,然后在PMA仍然存在的情况下: 加入脂多糖(LPS)(诱导浓度:100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓度:20ng/mL)(abs04123)培养48h,诱导其向M1极化; ...
THP-1可以被诱导分化为巨噬细胞M1和M2,并释放相应的细胞因子[1,2];THP-1首先被佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,随后进行下一步极化:巨噬细胞M1极化:通过脂多糖(LPS)和IFN-γ诱导M1极化,释放出TNF-α、IL-6等细胞因子,这是典型的炎症模型。巨噬细胞M2极化:通过 IL-4 、IL-13和巨噬细胞集落刺激...
诱导后,THP-1细胞会贴壁并显示出类似巨噬细胞的形态。可以通过PBS洗涤去除未分化的悬浮细胞。 2️⃣ THP-1细胞的极化方法 M1型巨噬细胞极化(经典激活) 诱导剂:LPS (脂多糖) 和 IFN-γ (干扰素-γ) 步骤: 使用PMA诱导分化后的THP-1细胞。 在培养基中添加100 ng/mL LPS和20 ng/mL IFN-γ。 继续培养...