将THP-1单核细胞分化为 M0/M1/M2 巨噬细胞的步骤 下图演示了如何将单核细胞分化为 M0/M1/M2 巨噬细胞。 (A)图是细胞表型变化的相差显微镜图像。可见,用200ng/mL PMA刺激 72小时后,悬浮的 THP-1 单核细胞分化为 M0 巨噬细胞,粘附在细胞壁上,并有伸展的突起。接着,再用20ng/...
可见,用200ng/mL PMA刺激 72小时后,悬浮的 THP-1 单核细胞分化为 M0 巨噬细胞,粘附在细胞壁上,并有伸展的突起。接着,再用20ng/mL IFN-γ和 100ng/mL LPS(诱导向M1分化) 或20ng/mL IL-4(诱导向M2分化) 处理 24小时后,巨噬细胞呈现较大的胞体和较长的突起,说明可能分别往M1或M2分化了。 (B)图...
富衡THP-1成巨噬细胞诱导试剂盒效果展示 THP-1成巨噬细胞诱导分化试剂盒用于将THP-1细胞系分化为巨噬细胞(M1或M2型)。试剂盒包含细胞及各阶段诱导液。分化过程包括培养THP-1细胞,将THP-1诱导为M0型巨噬细胞,再进一步诱导细胞,使其极化为M1或M2型巨噬细胞。该试剂盒为科研提供了一种便捷、稳定的巨噬细胞...
M0巨噬细胞通常处于静息状态,如果需要进一步分化为M1(促炎性)或M2(抗炎性)巨噬细胞,则可通过加入IFN-γ、LPS(M1)或IL-4(M2)进行进一步诱导。 THP-1细胞诱导成树突状细胞(DC) 培养THP-1细胞:与诱导M0相同,将THP-1细胞在10% FBS的RPMI-1640培养基中培养。 GM-CSF和IL-4诱导:加入50 ng/mL的粒细胞-巨噬...
基因测序及Western blot结果证实GLP-1R-/-THP-1细胞系构建成功。流式细胞术结果显示,M0型巨噬细胞高表达CD14+,M1型高表达CD14+CD80+,M2型高表达CD14+CD206+。qRT-PCR结果显示,与WT组相比,KO组诱导得到的巨噬细胞中M1型巨噬细胞标志物mRNA表达明显升高,M2型巨噬细胞标志物mRNA表达显著降低。此外,GLP-1R...
为了成功地将THP-1细胞诱导成M0巨噬细胞,并随后将其极化为M1或M2巨噬细胞,需要考虑以下几个关键因素和方法: THP-1细胞向M0巨噬细胞的分化 1.PMA诱导:通常使用佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞分化为巨噬细胞样细胞。常用方法是将THP-1细胞与150 nM的PMA孵育24小时。之后,将细胞在RPMI培养基中继续培养24小时,以...
THP-1细胞培养 THP-1是人急性单核细胞白血病细胞,是单核-巨噬细胞相关研究中的常用细胞系工具,可通过PMA(佛波酯)诱导分化为M0型巨噬细胞,然后根据实验需求进一步诱导为M1或M2型巨噬细胞。 细胞形态:悬浮细胞,圆形,大小均一,小而透亮(下图Fig1来自ATCC网站)。
当PMA 添加到 THP-1 细胞中时,它使它们表达表面标志物CD14、CD16和CD68,这是 M0 巨噬细胞的特征。PMA 还诱导 M0 巨噬细胞产生促炎细胞因子。在被诱导为M0细胞后,继续用 PMA 联合其他因子进一步处理,就可以激活 M0 巨噬细胞并将其分化为 M1 或 M2 巨噬细胞。 具体诱导过程见下图 图片引用自:https://www...
这两个标记物可以帮助我们确认细胞是否成功诱导成了M0巨噬细胞。 后续实验 🧪 诱导完M0之后,我会进行不同药物的干预实验。不过要注意,后续使用的培养基里不能含有PMA哦。至于M1和M2的实验,我暂时还没经验,但可以参考一些文献,比如《Optimization of differentiation and transcriptomic profile of THP-1 cells into...
需要注意的是,THP-1细胞系的一个特点是诱导或亚型极化后,marker并不是独特表达的。例如,CD206在M0、M1中都有表达。基因水平的差异比较显著,CD206的FC和ELISA中的IL1b、IL6差异也比较显著。 RAW264.7与THP-1的区别 🐭另外,RAW264.7也是单核巨噬细胞系,但它是小鼠源的,而THP-1是人源的。同学们千万不要搞...