THP-1诱导完成后可通过流式和免疫荧光、ELISA或特异性标记物(如IL1、IL10、精氨酸酶)的基因表达分析来评估向M1和M2型巨噬细胞的正确分化,并且从形态上也可以看出来,都是最基础的鉴定方法,这就不一一述来了。 PMA刺激后的THP-1 THP-1细胞的诱导的M1形态(PMA) Thp-1细胞诱导的M2形态(PMA) THP-1诱导并不...
巨噬细胞进一步诱导成M2型实验步骤：（1）诱导培养基的配置：向1640完全培养基（含胎牛血清）里加入PMA（诱导浓度：100ng/mL）、加入IL-4(诱导浓度：20ng/mL)（abs04698）、IL-13(诱导浓度：20ng/mL)（abs04079）制成诱导培养基；（2）诱导培养：将已经诱导成的巨噬细胞上清弃除，加入诱导培养基（6孔板，每...
THP-1细胞培养 THP-1是人急性单核细胞白血病细胞,是单核-巨噬细胞相关研究中的常用细胞系工具,可通过PMA(佛波酯)诱导分化为M0型巨噬细胞,然后根据实验需求进一步诱导为M1或M2型巨噬细胞。 细胞形态:悬浮细胞,圆形,大小均一,小而透亮(下图Fig1来自ATCC网站)。 注意:显微镜下观察之前,可以轻轻晃动培养瓶或孔板,静...
巨噬细胞被分为两种主要类型:M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞。THP-1细胞通常用佛波酯(PMA)(abs9107)诱导分化为巨噬细胞,然后在PMA仍然存在的情况下: 加入脂多糖(LPS)(诱导浓度:100ng/mL)(abs47014848)、IFN-γ(诱导浓度:20ng/mL)(abs04123)培养48h,诱导其向M1极化; 加入IL-4(诱导浓度:20ng/mL)(abs04698...
THP-1细胞,这是一种可以分化为巨噬细胞的人类白血病单核细胞系。这允许在无直接细胞接触交互作用的情况下,研究巨噬细胞分泌体对共培养癌症细胞的影响(例如,对生长、药物反应或基因表达的影响),体外THP-1单核细胞分化为极化巨噬细胞用于研究M1和M2型巨噬细胞群体对其他细胞的影响,M1型巨噬细胞通常被认为是抑制肿瘤...
3. M2型巨噬细胞极化(替代激活) 诱导剂:IL-4 (白细胞介素-4) 和 IL-13 (白细胞介素-13) 步骤: 使用PMA诱导分化后的THP-1细胞。 在培养基中添加20 ng/mL IL-4和20 ng/mL IL-13。 继续培养24至48小时。 M2型巨噬细胞通常具有抗炎和组织修复功能,可以通过检测Arginase-1、CD206等标志物来验证极化...
为了成功地将THP-1细胞诱导成M0巨噬细胞,并随后将其极化为M1或M2巨噬细胞,需要考虑以下几个关键因素和方法: THP-1细胞向M0巨噬细胞的分化 1.PMA诱导:通常使用佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞分化为巨噬细胞样细胞。常用方法是将THP-1细胞与150 nM的PMA孵育24小时。之后,将细胞在RPMI培养基中继续培养24小时,以...
图1. 巨噬细胞分化为M1和M2 PMA诱导THP-1步骤：将处于对数生长期的THP-1细胞离心，用RPMI-1640培养...
用胰酶消化5分钟后，加以下buffer PBS+0.5%+2 mM EDTA 用细胞刮刀把细胞轻轻刮下来，吹打重悬 ...
巨噬细胞进一步诱导成M2型实验步骤: (1)诱导培养基的配置:向1640完全培养基(含胎牛血清)里加入PMA(诱导浓度:100ng/mL)、加入IL-4(诱导浓度:20ng/mL)(abs04698)、IL-13(诱导浓度:20ng/mL)(abs04079)制成诱导培养基; (2)诱导培养:将已经诱导成的巨噬细胞上清弃除,加入诱导培养基(6孔板,每孔2mL)培养48...