过去研究人员曾试图往人类多能干细胞(hPSCs)中插入DNA序列,让细胞发生定向分化,但是遗憾的是分化细胞总会携带这些人为插入的序列。中科博生。研究人员并没有直接修改细胞基因组,插入诱导细胞转化的DNA序列。而是选取了 “含有PiggyBac转座子的Tet-On 3G药物诱导基因表达系统”。与 先前的Tet On系统相比,这个被称为...
如今,在《Scientific Reports》的这篇文章中,研究人员并没有直接修改细胞基因组,插入诱导细胞转化的DNA序列。而是选取了 “含有PiggyBac转座子的Tet-On 3G药物诱导基因表达系统”。与 先前的Tet On系统相比,这个被称为XLone的新系统能显著降低背景表达,同时提高强力霉素(doxycycline)敏感性(hPSCs的转基因改造与细胞对...
人T淋巴瘤细胞(Tet-on基因修饰)来源有保障,状态佳且传代次数好,经测试不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶,具有高品质、活性好、存活率高等特点。 人T淋巴瘤细胞(Tet-on基因修饰)的详细资料: 人T淋巴瘤细胞(TET-ON基因修饰)厂家,人T淋巴瘤细胞(TET-ON基因修...
为了确定最适合不同应用的系统,我们比较了经常使用的细胞类型中的Tet-on变体,这些细胞要么瞬时转染相关质粒,要么稳定地转导“一体式”慢病毒载体。 V10变异体在瞬时转染的细胞中表现最佳,在没有DOX的情况下没有背景活性,高DOX诱导活性和最高的折叠诱导活性。 由于V16系统对DOX的敏感度很高,如果细胞内DOX浓度很低,那...
PCR检测Tet-on基因整合,TRE-luc质粒瞬时转染含有Tet-on的细胞克隆,Dox 诱导表达后,检测荧光素酶活性,筛选高诱导表达的抗性克隆,定名为HD1BEL-7402 Tet-on细胞.结果:建立了高效诱导表达的HD1 BEL-7402 Tet-on细胞模型.结论:建立的细胞模型为以后转染TER-x质粒(如GFP),研究任何感兴趣的目的基因的调控打下了基础....
Tet-on系统对胰岛细胞瘤中TRB3基因的表达调控作用
目的利用Tet-On诱导可调控系统构建表达淀粉样前体蛋白突变基因(APPswe)细胞模型。方法构建重组质粒p TRE-APPswe-Flag,利用慢病毒将其包装转染SH-SY5Y细胞。Puromycin筛选72 h后,通过强力霉素诱导,Western blot检测验证,免疫荧光检测APPswe表达情况。结果强力霉素诱导后,筛选的细胞Western blot检测Flag标签蛋白表达明显,免疫...
目的 构建可以用强力霉素调控表达的人肝癌HepG2Tet-on细胞系,为进一步研究肝癌相关基因功能奠定基础.方法 用脂质体转染法将pWHE146质粒转染到人肝癌HepG2细胞中,用G418筛选出稳定表达细胞克隆;单克隆分别扩增后,瞬时转染pTRE-hyg-luc质粒;强力霉素诱导表达后,检测荧光素酶表达活性,挑选出受强... 查看全部>> ...
点,Tet—on/Tet—off 系统是 目前 比较成 熟的 真核生 物基 因诱 导 表达 系统 之一 ,已被成功地应用于细胞基因诱导表达的研 究～ 。 倍体稳定性是细胞行使正常功能的基础 ,染色体结构或数 目的异 常 必然 造成严重后果 ,染色体非整倍性是肿瘤 细胞 的基 ...
On系统强力霉素调控NICD稳定表达的骨髓间充质干细胞,然后将此细胞移植至肾缺血再灌注损伤大鼠体内,术后检测血清肌酐水平,肾组织中骨髓间充质干细胞分布以及血管内皮生长因子和肿瘤坏死因子α表达变化.结果与结论:①NICD蛋白...