在基因功能研究领域，Tet-On系统通过精确控制基因表达，帮助科学家揭示了基因在生命活动中的关键作用。同时，在疾病模型的构建上，它也被用于创建可诱导表达疾病相关基因的细胞或动物模型，从而推动了疾病机制研究的深入进行。此外，Tet-On系统还为药物研发提供了一个高效的筛选环境，大大加速了新药的研发进程。让我们通过...
Tet-on系统是一种基因表达调控技术，其核心在于将带有tet-on元件的载体与目的基因连接，然后将其转入细胞。在细胞培养过程中，如果希望诱导目的基因表达，则需向培养基中添加四环素。四环素的存在会促使tet-on系统启动目的基因的表达，从而实现对基因表达的精确控制。这一过程能够人为调节基因表达的时间和强度...
体外-诱导型慢病毒使用-细胞实验-tet-on慢病毒 在未加入Dox的时候,目的基因也会有非常微弱的表达,这种表达强度随着Dox的增加而增加。 体内-诱导型慢病毒使用-裸鼠移植瘤模型-tet-on慢病毒[2] •动物选择:6周龄裸鼠 •细胞选择:神经母细胞瘤SK-N-SH-FTH1细胞系(6E6cells/limb;100μl) •药物剂量:DOX...
🌱 与传统的过表达系统相比,Tet-on/off系统更为复杂,但并非没有必要。直接过表达某些基因可能会导致细胞死亡,而Tet-on系统只有在加入DOX时才会触发基因过表达,从而减缓细胞的死亡速度。🔬 实验设计思路: 使用Tet-on系统表达某个基因(假设该基因会导致细胞死亡)。
项目概要:在 Fadu细胞中可诱导过表达CNTNAP2 实验设计:使用: PiggyBac转座子与Tet-On系统共表达质粒 PiggyBac转座子将目标基因与tet-on系统整合到宿主细胞的染色体中,当系统添加了强力抗生素多西环素(doxycycline)时,目标基因会迅速在高水平上表达。 验证结果:qPCR验证 在加入Dox后,Fadu细胞中可诱导过表达CNTNAP2...
过去研究人员曾试图往人类多能干细胞(hPSCs)中插入DNA序列,让细胞发生定向分化,但是遗憾的是分化细胞总会携带这些人为插入的序列。中科博生。研究人员并没有直接修改细胞基因组,插入诱导细胞转化的DNA序列。而是选取了 “含有PiggyBac转座子的Tet-On 3G药物诱导基因表达系统”。与 先前的Tet On系统相比,这个被称为...
如今,在《Scientific Reports》的这篇文章中,研究人员并没有直接修改细胞基因组,插入诱导细胞转化的DNA序列。而是选取了 “含有PiggyBac转座子的Tet-On 3G药物诱导基因表达系统”。与 先前的Tet On系统相比,这个被称为XLone的新系统能显著降低背景表达,同时提高强力霉素(doxycycline)敏感性(hPSCs的转基因改造与细胞对...
此外,为了保证载体在细胞内的稳定存在和正常功能,Tet - On 诱导表达辅助载体还配备了合适的终止子,确保转录过程的正常终止。同时,通常会有筛选标记基因,比如抗生素抗性基因,用于在转染细胞后筛选出成功摄取载体的细胞。当将该载体与目的基因构建体共同转染到细胞中后,可以在含有相应抗生素的培养基中培养细胞,筛选出含有...
在Fadu细胞中，使用PiggyBac转座子与Tet-On系统共表达质粒，实现CNTNAP2的可诱导过表达。添加强力抗生素多西环素后，目标基因迅速在高水平上表达。验证结果：qPCR证实，在加入Dox后，Fadu细胞中CNTNAP2实现了可诱导过表达。Tet-On可诱导过表达系统为科研提供新工具，推动生物研究领域的创新。