研究人员并没有直接修改细胞基因组,插入诱导细胞转化的DNA序列。而是选取了 “含有PiggyBac转座子的Tet-On 3G药物诱导基因表达系统”。与 先前的Tet On系统相比,这个被称为XLone的新系统能显著降低背景表达,同时提高强力霉素(doxycycline)敏感性(hPSCs的转基因改造与细胞对强力霉素的调节反应密切相关)。另外,XLone...
而是选取了 “含有PiggyBac转座子的Tet-On 3G药物诱导基因表达系统”。与 先前的Tet On系统相比,这个被称为XLone的新系统能显著降低背景表达,同时提高强力霉素(doxycycline)敏感性(hPSCs的转基因改造与细胞对强力霉素的调节反应密切相关)。另外,XLone系统中的PiggyBac元件让hPSCs的转基因改造更加快速、稳定和高效。 ...
目的 构建可以用强力霉素调控表达的人肝癌HepG2Tet-on细胞系,为进一步研究肝癌相关基因功能奠定基础.方法 用脂质体转染法将pWHE146质粒转染到人肝癌HepG2细胞中,用G418筛选出稳定表达细胞克隆;单克隆分别扩增后,瞬时转染pTRE-hyg-luc质粒;强力霉素诱导表达后,检测荧光素酶表达活性,挑选出受强... 查看全部>> ...
U87MG 稳定表达 Tet-on 细胞系,Brain-Nervous System 产品形式 细胞生物学 保存建议 Vapor phase of liquid nitrogen, or below -130 其他 Applied Biological Materials Inc(abm)公司是加拿大一家不断寻找用于生命科学研究和药物开发新产品的公司。众多的产品线全面涵盖了许多尖端技术,主要包括RT-PCR,RNA干扰的分子...
U251MG 稳定表达 Tet-on 细胞系,Brain-Nervous System 产品形式 细胞生物学 保存建议 Vapor phase of liquid nitrogen, or below -130 其他 Applied Biological Materials Inc(abm)公司是加拿大一家不断寻找用于生命科学研究和药物开发新产品的公司。众多的产品线全面涵盖了许多尖端技术,主要包括RT-PCR,RNA干扰的分子...
Tet-off/Tet-on系统是利用大肠杆菌Tn10转座子中四环素阻遏操纵子的调控元件在真核细胞中定量并特异地控制外源基因表达的体系 .将四环素控制的反式活化因子(rtTA)基因整合进Jurkat细胞基因组中 ,建立了JurkatTet-on细胞系 .四环素衍生物doxycycline可诱导瞬时转染至该细胞系的荧光素酶基因表达升高32倍左右 ,充分起效时...
Tet-on系统对胰岛细胞瘤中TRB3基因的表达调控作用
为了确定最适合不同应用的系统,我们比较了经常使用的细胞类型中的Tet-on变体,这些细胞要么瞬时转染相关质粒,要么稳定地转导“一体式”慢病毒载体。 V10变异体在瞬时转染的细胞中表现最佳,在没有DOX的情况下没有背景活性,高DOX诱导活性和最高的折叠诱导活性。 由于V16系统对DOX的敏感度很高,如果细胞内DOX浓度很低,那...
目的利用Tet-On诱导可调控系统构建表达淀粉样前体蛋白突变基因(APPswe)细胞模型。方法构建重组质粒p TRE-APPswe-Flag,利用慢病毒将其包装转染SH-SY5Y细胞。Puromycin筛选72 h后,通过强力霉素诱导,Western blot检测验证,免疫荧光检测APPswe表达情况。结果强力霉素诱导后,筛选的细胞Western blot检测Flag标签蛋白表达明显,免疫...
点,Tet—on/Tet—off 系统是 目前 比较成 熟的 真核生 物基 因诱 导 表达 系统 之一 ,已被成功地应用于细胞基因诱导表达的研 究～ 。 倍体稳定性是细胞行使正常功能的基础 ,染色体结构或数 目的异 常 必然 造成严重后果 ,染色体非整倍性是肿瘤 细胞 的基 ...