tailpcr11原理利用nestedpcr提高扩增产物特异性利用2轮高温1轮低温交替的超级pcr循环提高特异产物的扩增降低非特异产物的比例第三轮扩增12tailpcr待改进之处ad引物的结合位点有限因而成功的几率丌够高特异产物大小难以控制常扩增到500bp产物及第3轮中仍可检测到非特异带而理想的状况是要么出现特异带要么没有任何带hitail...
TAIL-PCR法快速分离红曲霉色素突变株T-DNA插入位点侧翼序列,TAIL-PCR法快速分离红曲霉色素突变株T-DNA插入位点侧翼序列,君,已阅读到文档的结尾了呢~~ 立即下载 相似精选,再来一篇 更多 喜欢该文档的用户还喜欢 城市排水系统蓄滞洪设施的设计与性能分析 中国自动运输机器人行业市场占有率及投资前景预测分析报告:博...
(ThermalasymmetricinterlacedPCR 简称TAIL 2PCR )方 法从这些突变体中成功地克隆到了各自的致病相关 基因,为今后的进一步研究打下基础;同时,这种改进后的TAIL 2PCR 方法也为其它突变体特别是转座子插入突变体中目的基因的克隆提供了一种新方法,与其他基因克隆方法尤其是经典的质粒拯救方法相比,本方法具有明显的简便、...
优化TAIL-PCR方法克隆棉花抗逆相关转录因子编码基因
结果显示, TAILPCR 和 Tn5 质粒拯救结合使用, 可有效地鉴别 Tn5 的插入位点和相应的功能基因。 TAILPCR 鉴别的 5 株突变体是 Tn5 分别插入在分泌系统结构蛋白 F 基因( 、 cAMP 调控蛋白、 膜镶嵌蛋白酶酶原、 S 蛋硫氨酸脱羧酶亚基和 基因上; Tn5 质粒拯救法鉴别的 3 株突变体是 Tn5 分别...
采用热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)法分离红曲霉色素突变株T-DNA插入位点的侧翼序列,扩增到了长度介于500bp~1300bp之间的7个DNA片段,对这些DNA片段测序,并采用生物信息学方法对测序结果进行了分析,表明其中有1个片段与烟曲霉Af 293 发育调控子flbA的相似性较高.TAIL-PCR法成功应用于分...
[方法] F.Johnsoniae菌株M165的基因组DNA用作模板,使用5'end和3'end和3'end和任意引物的三个特定的嵌套引物通过热不对称隔离PCR(Tail.PCR)扩增菌株M165的ArOA基因。分析得到的序列。[结果]电泳测定结果表明,扩增产物的尺寸与预期产品组成:测序分析表明,芳烃基因的全长是1 230bp.enconding 410氨基酸。aroa蛋白的...
利用改良的热不对称交错PCR方法克隆到CHS基因Gbchs20结果表明,Gbchs 长l 38bp,编码3 4个氨基酸并包含3 末端序列0GbCHS 蛋白质序列与其他植物的CHS蛋白质序列高度同源,包含CHS蛋白质保守的环化作用活性位点,催化活性位点\香豆素活性位点\及催化活性基序0改良后的TA L-PCR方法为基因全长的克隆提供了一种简单快速...
构建植物病原菌突变体库是进行新基因发掘和功能基因组学研究的有效途径之一.为快速准确地鉴定Tn5的插入位点和相应的功能基因,研究采用热不对称PCR(TAIL-PCR)和Tn5转座子质粒拯救两种技术,鉴别了在筛选水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola)Tn5插入突变体库过程中获得的8个在水稻(Oryza sativa)上毒性.....
摘要 双拷贝基因及其侧翼序列的克隆是分子生物学中的一个难点.将优化的反向PCR (Inverse PCR,iPCR)与TAIL-PCR相结合,有效地克隆双拷贝基因及其侧翼序列.先用Southern blotting方法确定一种能获得合适长度片段的限制性内切酶,然后用优化的iPCR方法对该酶切产物进行自连和扩增,将2个拷贝的侧翼序列区分开.根据iPCR...