TA克隆(TA cloning)是一种利用限制性内切酶与连接酶进行DNA片段克隆的技术。TA克隆技术起源于1990年代末,由英国科学家平克霍姆(Nathaniel Perkins)和莫瑞尔(Jeffrey Moore)首次提出并发表于《生物技术》杂志上。这种方法主要适用于PCR扩增得到的DNA片段的克隆。 在TA克隆中,PCR扩增得到的目标DNA片段具有具有A尾或T尾的...
ta cloning原理 TAcloning是一种分子克隆技术,其原理基于T端连接(Thymine-Adenine)。 首先,在PCR反应中,通常使用具有T端互补性的引物来扩增目标DNA。在PCR反应后,这种T端向单链的PCR产物末端添加A碱基。这个PCR产物现在具有一些额外的碱基,因为它的末端有一些A碱基。 然后,TA cloning使用一种质粒载体,该质粒具有与...
测序用 TOPO® TA Cloning®试剂盒可提供高效、5 分钟的一步克隆策略(“TOPO® 克隆”),用于将 Taq 聚合酶–扩增 PCR 产物直接插入至质粒载体以进行测序。各试剂盒均使用具有经过特殊设计的测序引物位点(可从各反应中获得更多的插入序列和更少的载体序列)的 pCR™4-TOPO® TA 载体,并可根据您的需要和...
TA克隆技术(TA cloning)利用Taq聚合酶具有末端转移酶(TdT)活性,但却不具有3'-5'端外切酶校准活性的特点,可在PCR产物的3'端加上一个非模板依赖碱基“A”。pMD18-T是一种高效克隆PCR产物的专用载体,它是由pUC18载体在Xba I和Sal I识别位点间插入一个EcoR V位点,然后用EcoR V进行酶切使质粒线性化,并在它的...
内含TOPO TACloning®reagents (Box 1)和One Shot®Chemically Competent cells (Box 2). TOPO反应盐溶液:200 mM NaCl,10 mM MgCl2。 实验步骤: 总体步骤: PCR反应 进行TOPO反应,连接PCR产物与TOPO载体 用连接好的TOPO克隆转化TOPO感受态细胞 蓝白斑筛选 细节: 1,PCR反应 按正常步骤用Taq聚合酶进行PCR反应循...
TA克隆（TA cloning）是一种分子生物学技术，用于将DNA片段插入到载体质粒中。这项技术的目的是快速且简便地将PCR产物或其他小的DNA片段引入到质粒载体中，以便进行基因的进一步分析和操作。TA克隆特别适用于那些不需要大规模克隆且对克隆效率要求不是非常高的实验。TA克隆的主要用途包括：1. **克隆PCR...
以下以PCRII的TA克隆试剂盒(from Invitrogen 公司)为例讲述TA cloning的过程: 从牛痘病毒(Vaccinia)中提取的DNA拓扑异构酶1可以识别5’-CCCTT序列,并连接5’-CCCTT和外源DNA(Shuman, 1991,1994),因而可用于TA cloning。 参考文献: 1. Joseph Sambrook,David W Russell. Molecular cloning(3rd edition) ...
pMD 18-T Vector是一种高效克隆PCR产物 (TA Cloning)的专用载体。它是TaKaRa独自研究开发,由pUC18载体改建而成的。在pUC18载体的多克隆位点处的Xba I 和Sal I识别位点之间插入了EcoR V 识别位点,用EcoR V进行酶切反应后,再在两侧的3'端添加“T”而成。因大部分耐热性DNA聚合酶反应时都有在PCR产物的3'末端...
网络释义 1. 克隆 012694 陈雷 TA cloning TA cloning —— A review 摘要: 摘要: 克隆(TA-cloning) 载体克隆。 产物高效克隆的方法。wenku.baidu.com|基于1 个网页 例句 释义: 全部,克隆 更多例句筛选 1. Direct cloning and sequencing of restricted fragments with cohesive-ends by means of TA cloning ...