说起siRNA、shRNA和miRNA就不得不提RNA干扰(RNA interference,RNAi),它是指由一段短双链RNA引起的基因沉默现象。1998年,Andrew Z. Fire等在实验中发现,单独使用纯化的正义RNA链或者反义RNA,不能导致秀丽隐杆线虫的肌肉抽搐,作为对照加入的双链RNA则具有极强的抽搐效果[1]。加入的双链RNA的抑制效果远强于理论上...
通过与miRNA的加工相同的RNAi机制，shRNA被加工成siRNA。使用细菌或病毒载体，shRNA被导入靶细胞的细胞核内，在某些情况下，载体可以稳定地整合到基因组中（慢病毒转染会随机整合到靶细胞基因组DNA中，常规转染如PCDNA3.1不整合载体以游离状态存在于靶细胞核内）。根据驱动表达的启动子的不同，shRNA可被RNA聚合酶II...
shRNA：一般是通过载体导入细胞，在细胞内由 RNA 聚合酶 Ⅲ 转录生成，其结构中包含茎环结构。shRNA 会被加工成类似于 siRNA 的形式，进而参与 RISC 形成并发挥基因沉默作用。miRNA：是内源性的非编码 RNA，由基因组转录后经过一系列加工过程形成成熟的 miRNA。它通常与靶 mRNA 的 3' 非翻译区（3'UTR）不...
shRNA:更适合用于需要长期稳定抑制基因表达的情况,如构建稳定转染的细胞系、动物模型等。在基因治疗研究中,shRNA 也常被用于设计针对特定疾病相关基因的治疗策略。miRNA:主要用于研究细胞内源性的基因调控网络,以及探索其在疾病发生发展中的作用。此外,基于 miRNA 的药物研发也逐渐成为一个重要的领域,通过调节 miRNA 的...
shRNA:更适合用于需要长期稳定抑制基因表达的情况,如构建稳定转染的细胞系、动物模型等。在基因治疗研究中,shRNA 也常被用于设计针对特定疾病相关基因的治疗策略。miRNA:主要用于研究细胞内源性的基因调控网络,以及探索其在疾病发生发展中的作用。此外,基于 miRNA 的药物研发也逐渐成为一个重要的领域,通过调节 miRNA 的...
1、三者的成熟体都是长度在20-25nt的小RNA,siRNA是3’端有两个游离的碱基,5’端有磷酸基团的双链RNA,shRNA经过加工形成siRNA,miRNA则最终形成单链RNA。 2、siRNA一般是人工合成的线性双链RNA(dsRNA),shRNA、miRNA则是通过发卡结构形成的局部双链RNA。siRNA和shRNA的双链区是完全互补配对的,而miRNA绝大多数情...
慢病毒 shRNA 和 miRNA 分析 RNAi 载体的慢病毒和腺病毒递送 经过不断发展,病毒可以将核酸有效递送到细胞,病毒成为接触难转染的细胞类型以便实现蛋白过表达或敲低的方法。腺病毒、致癌反转录病毒和慢病毒已经广泛用于在细胞培养和体内递送(表1)。 表1.为您的实验选择最佳的病毒系统。
慢病毒 shRNA 和 miRNA 分析 经过不断发展,病毒可以将核酸有效递送到细胞,病毒成为接触难转染的细胞类型以便实现蛋白过表达或敲低的方法。腺病毒、致癌反转录病毒和慢病毒已经广泛用于在细胞培养和体内递送(表1)。 表1.为您的实验选择最佳的病毒系统。 病毒系统瞬时表达稳定表达 分裂细胞不分裂细胞...
shRNA/miRNA AAV Production Service: Adeno-associated virus (AAV) is a small virus (20 nm in diameters) replication-defective, nonenveloped virus, which infects humans and some other primate species. AAV is not currently known to cause disease and consequently the virus causes a very mild immun...
siRNA与shRNA的主要区别在于来源、加工途径和稳定性。siRNA通常为外源合成，通过双链RNA剪切后产生，而shRNA是通过核内转录后加工。shRNA的稳定性使其可以提供更持久的基因沉默效果。miRNA则源于内源的非编码pri-mRNA，加工成熟后通过Dicer酶作用，与RISC结合执行不同的调控机制。选择siRNA、shRNA或miRNA时...