组织特异性干扰: miR30-shRNA 表达shRNA常用的polⅢ型启动子有U6和H1，由于构建序列较短，shRNA能够轻易的插入病毒载体，但是想实现特定组织中的基因沉默，少不了组织特异性启动子的助力，然而U6和H1并不具有组织特异性。基于miRNA骨架的shRNA干扰载体，采用了pol II型启动子(包括多种组织特异性启动子)驱动，从而...
哺乳动物 miR30 - shRNA 干扰载体质粒载体结合了 miR30 结构特点与 shRNA 干扰技术,为基因沉默研究提供了一种高效且特异的工具。该载体构建时以 miR30 为骨架进行设计。在启动子方面,常采用具有广泛适用性的启动子如 CMV 启动子或 U6 启动子来驱动基于 miR30 结构改造的 shRNA 转录。miR30 - shRNA 的序列...
首先,多个shRNAmiR可以作为单个多顺反子进行转录,在细胞内加工成成熟的shRNA, 这使得单个转录物能同时干扰多个基因或靶向相同基因内的多个区域。 其次,在该载体系统中,用户定制的蛋白编码基因与shRNAmiR处于相同的多顺反子内,该ORF的表达可用于监测shRNA的转录(如果使用的是荧光/抗性标记)或可用于其他需要共表达...
1) 启动子选择性多：基于miR-30的shRNA可以通过多种RNA聚合酶II启动子转录，包括广谱启动子（CMV、CAG和EF1a等）、组织特异性（hSyn、TBG和cTnT等）或诱导型启动子（四环素启动子TRE）。2) 实现多个shRNA共表达：由于RNA聚合酶II可以启动较大的基因转录，因此多个shRNAmiRs可以作为多顺反子由单个启动子驱动表达。
miRNA先由RNA聚合酶II转录成初级miRNA,再被Drosha酶加工成前体miRNA,最后在胞浆中被Dicer酶剪切为成熟的miRNA。而shRNA则通过聚合酶III型启动子驱动,持续表达以实现基因沉默。 🎯基于miR-30的shRNA设计 设计时,我们选择合适的启动子,并保留miR-30的5'和3'flanking region序列,将靶点序列替换成熟区域的序列。设计...
· 维真助力 - AAV ·基因信息：ACSL6，长链酰基辅酶A合成酶6 实验动物：肝癌小鼠 病毒产品：AAV8-TBG-miR30-Acsl6-shRNA-GFP、AAV8-TBG-miR30-shRNA-GFP 注射方式：尾静脉注射 注射剂量：1.5×10^12GC/mouse 在肝癌小鼠中注射AAV8-shAcsl6，Acsl6表达量降低，并阻碍肿瘤进展 研究背景 肝癌是世界上第...
shRNAmir30简介 shRNA一般由聚合酶III型启动子(如U6)来启动,无法满足我们对特定组织中基因调控的需求,根据miRNA的作用机制,科研人员研发了基于miRNA结构的shRNA干扰载体,其中shRNAmir30载体应用较为广泛,该载体保持了miRNA的loop环和双臂,模拟了体内miRNA实现RNAi的过程,可以更有效的对目的基因进行敲低,同时shRNAmir...
1.启动子广泛选择:与传统shRNA只能在Pol III类型启动子(U6或者H1启动子)下表达不同,miR30-shRNA可使用Pol II类型启动子表达,例如:常用的广泛表达启动子(CMV、EF1A、CAG等)、Tet-On诱导调控启动子TRE、组织特异性启动子等。 2.miR30 context序列优化:miR30 context序列经过优化。与native miR30 context序列相比...
shRNAmir30简介 shRNA一般由聚合酶III型启动子(如U6)来启动,无法满足我们对特定组织中基因调控的需求,根据miRNA的作用机制,科研人员研发了基于miRNA结构的shRNA干扰载体,其中shRNAmir30载体应用较为广泛,该载体保持了miRNA的loop环和双臂,模拟了体内miRNA实现RNAi的过程,可以更有效的对目的基因进行敲低,同时shRNA...