先确定AP、TEMED的量都没问题,应该有各浓度的配方的,加少了或者没加的话就不会凝了.或者你也可以把分离胶配好了,用水封好了以后,把整个架子移到37℃培养箱中,能加快凝胶时间! 结果一 题目 SDS-PAGE胶不凝我配的是12%的胶,但是不凝固,加水封闭的时候能够清晰地分层!这是什么原因造成的啊?AP我是现配的!
做SDS-PAGE蛋白电泳配胶 12%的分离胶30分钟左右能凝固但配5%的浓缩胶分离胶时却不能凝固TEMED 加倍不凝固但AP加倍 可以凝 扫码下载作业帮搜索答疑一搜即得 答案解析 查看更多优质解析 解答一 举报 1,多加过硫酸铵试试2,多加点TEMED,可加速凝固3,配好胶后放在温箱里凝的快些,环境温度低会影响凝的速度.我在...
如果试剂没用错,检查APS和TEMED是否过期,APS保质期只有几天,APS和REMED加入的量的不够,凝胶过程很慢;气温太低,凝固也很慢。
1。保证没有漏加试剂! 2、浓缩胶由于浓度较低,所以一定要比分离胶加更多的AP和TEMED,分子克隆上的浓度就可以了。 3、有时候凝结,有时候不凝结,可能就要考虑另外一个因素了,就是溶解在page溶液中的氧气。氧气抑制PAGE 胶凝集,所以,你可以在配好溶液后,进行短暂的真空抽气,以排除溶解在溶液中的氧。 浓缩胶不...
SDS-Page电泳,我配的胶总是不凝固 配方是这样的: ACR-BIS 4ml tris-hcl (ph8.9)3.8ml 10% sds 0.1ml 水 2ml过硫酸铵是现配的 浓度10% 我一开始加的是50ul,试了一次不行,加到了200ul,TEMED 最多加到了100u,可还是不凝固,到底哪里出了问题啊!除了过硫酸铵和TEMED,可能会是其他成分有问题吗??我昨天...
SDS -PAGE 上层胶不凝固的原因有哪些作者 大飞370来源: 小木虫 1400 28 举报帖子 +关注 我的上层胶体系为: 30%丙烯酰胺溶液(29:1) 670ul PH6.8 Tris-Hcl 0.25mol/l 1ml 10% SDS 40ul 10% APS 40ul 蒸馏水 2.245ml [ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:12 ] 返回小木虫查看更多分享...
两种可能吧,TEMED或者过硫酸铵失效了!过硫酸铵很易失效,一般放置于4度冰箱内,放置1月左右(我们实验...
关于SDS-PAGE电泳小弟最近在做SDS-PAGE,发现了一些问题1.胶凝固后会缩一点点,导致加样孔变浅2.两边的两个孔加样后跑出来的条带不直不知是否正常,如果不正常问题可能是什么原因造成的不要
免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏...