先确定AP、TEMED的量都没问题,应该有各浓度的配方的,加少了或者没加的话就不会凝了.或者你也可以把分离胶配好了,用水封好了以后,把整个架子移到37℃培养箱中,能加快凝胶时间! 结果一 题目 SDS-PAGE胶不凝我配的是12%的胶,但是不凝固,加水封闭的时候能够清晰地分层!这是什么原因造成的啊?AP我是现配的!
SDS-PAGE蛋白电泳配胶不凝固做SDS-PAGE蛋白电泳配胶 12%的分离胶30分钟左右能凝固但配5%的浓缩胶分离胶时却不能凝固TEMED 加倍不凝固但AP加倍 可以凝
应该是pH有问题。如果pH不合适,即使加再多TEMED和过硫酸铵都不管用,即使凝了,跑胶也不顺利。
如果试剂没用错,检查APS和TEMED是否过期,APS保质期只有几天,APS和REMED加入的量的不够,凝胶过程很慢;气温太低,凝固也很慢。
【求助】请问SDS-PAGE胶,制胶时浓缩胶不凝固是怎么回事啊? 1。保证没有漏加试剂! 2、浓缩胶由于浓度较低,所以一定要比分离胶加更多的AP和TEMED,分子克隆上的浓度就可以了。 3、有时候凝结,有时候不凝结,可能就要考虑另外一个因素了,就是溶解在page溶液中的氧气。氧气抑制PAGE 胶凝集,所以,你可以在配好溶液后...
SDS -PAGE 上层胶不凝固的原因有哪些作者 大飞370来源: 小木虫 1400 28 举报帖子 +关注 我的上层胶体系为: 30%丙烯酰胺溶液(29:1) 670ul PH6.8 Tris-Hcl 0.25mol/l 1ml 10% SDS 40ul 10% APS 40ul 蒸馏水 2.245ml [ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:12 ] 返回小木虫查看更多分享...
两种可能吧,TEMED或者过硫酸铵失效了!过硫酸铵很易失效,一般放置于4度冰箱内,放置1月左右(我们实验...
加少了也不会不凝固。关键是AP的使用,AP只是起到引发反应的作用,加入极少量即可,一般是几个微升,千万不要加多,否则凝固速度过快,来不及灌胶就会凝固,即使能来得及灌胶,制出凝胶也是不均匀的。而且AP要在最后加入,如果配胶之后无法及时灌制,就不要加AP了,到灌胶之前再加入AP混匀。
1 关于SDS-PAGE电泳 小弟最近在做SDS-PAGE,发现了一些问题 1.胶凝固后会缩一点点,导致加样孔变浅 2.两边的两个孔加样后跑出来的条带不直 不知是否正常,如果不正常问题可能是什么原因造成的 不要复制长编大论,电泳的书我有 因为我做的是不连续电泳,而且是薄胶,最后加胶都是满出来的,没加封胶面的液体...