3、非还原SDS处理:生理体液、血清、尿素等样品,一般来说只用1%SDS,沸水中煮3分钟,不加还原剂,因而蛋白折叠没有被破坏,不用来测定分子量。 5、SDS-PAGE电泳凝胶中各主要成分分别有什么作用? 1.制胶缓冲液:浓缩胶选择pH6.7,分离胶选择pH8.9,选择tris-HCL系统 2.聚丙烯酰胺的作用:给蛋白质电泳提供载体,其凝固的...
1. 检查AP浓度：可能是AP吸收了水分结块，或者发生了氧化。在配制时，尽量避开中间部分，并尝试增加AP的用量。2. 检查TEMED：TEMED可能已经吸收水分或氧化，观察其颜色是否变得很黄。如果是这种情况，需要更换新的TEMED。3. 尝试将胶放入烘箱：将胶体放入烘箱中，温度设置为30℃，这有助于加快凝胶的凝固...
先确定AP、TEMED的量都没问题,应该有各浓度的配方的,加少了或者没加的话就不会凝了.或者你也可以把分离胶配好了,用水封好了以后,把整个架子移到37℃培养箱中,能加快凝胶时间! 结果一 题目 SDS-PAGE胶不凝我配的是12%的胶,但是不凝固,加水封闭的时候能够清晰地分层!这是什么原因造成的啊?AP我是现配的!
通常胶在30分钟到1小时内凝。如果凝的太慢,可能是TEMED,AP剂量不够。如果凝的太快,可能是AP和TEMED用量过多,此时胶太硬易裂,电泳时易烧胶。 3.浓缩胶与分离胶断裂、板间有气泡对电泳的影响 前者主要原因是拔梳子用力不均匀或过猛所致;后者是由于在解除制胶的夹...
做SDS-PAGE蛋白电泳配胶 12%的分离胶30分钟左右能凝固但配5%的浓缩胶分离胶时却不能凝固TEMED 加倍不凝固但AP加倍 可以凝 扫码下载作业帮搜索答疑一搜即得 答案解析 查看更多优质解析 解答一 举报 1,多加过硫酸铵试试2,多加点TEMED,可加速凝固3,配好胶后放在温箱里凝的快些,环境温度低会影响凝的速度.我在...
SDS-PAGE电泳中比较常见的问题及解答~1. 蛋白胶凝固不好,很长时间才凝固?答:加大TEMED及过硫酸铵的用量,使胶的凝固速度加快。确保玻璃板洗干净,防止玻璃板上有干胶或残留物附着。2. 蛋白胶不凝固?答:加大TEMED及过硫酸铵的用量;胶凝固时放置于37℃或强光处;使用新鲜配制的过硫酸铵,过硫酸铵容易放置时间过长...
在SDS-PAGE凝胶制备过程中，可能会遇到各种问题。以下是一些常见问题及其解决方案：1. 漏胶问题：• 原因：玻璃板未对齐或缺损，垫片密闭性不良。• 解决方案：确保玻璃板干燥，对齐后紧锁夹子，检查玻璃板完好性。2. 凝胶不凝固：• 原因：APS或TEMED失效，操作不当。• 解决方案：使用新鲜APS，确保TEMED未...
如果试剂没用错，检查APS和TEMED是否过期，APS保质期只有几天，APS和REMED加入的量的不够，凝胶过程很慢；气温太低，凝固也很慢。
应该是pH有问题。如果pH不合适，即使加再多TEMED和过硫酸铵都不管用，即使凝了，跑胶也不顺利。