(1)过硫酸铵(AP)推荐加入1mL超纯水,吹吸收混匀配制成10%过硫酸铵工作液,储存于2-8˚C,建议1-2周内用完; (2)SDS-PAGE凝胶配制方法请参照配方表,部分表如下: 表1:SDS-PAGE分离胶配方表 凝胶浓度 各组分名称 各种凝胶体积所对应的各种组分的取样量 5mL 10mL 15mL 20mL 25mL 30mL 40mL 50mL 6% Gel H2O...
SDS-PAGE 凝胶配制 sds-page 是变性凝胶电泳,配制的胶中要加 SDS;消除蛋白的电荷差异,这样电泳的结果就只与蛋白分子大小有关了,但它会使蛋白变性,尤其二聚体蛋白,容易分裂;PAGE 则是非变性的凝胶电泳,涉及的因素很多,可以用来检验蛋白复性的结果 保存条件: 1M Tris-HCl, pH8.8、10% SDS、Ammonnium persulfate...
聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE凝胶)在生物学实验中被广泛应用,主要用来分离和鉴定不同分子量大小的蛋白质;应用最为普遍的方式是浓缩胶加上分离胶,前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用,后者则是对蛋白质样品进行分离。 由于受到试剂来源、纯度以及配制方法等因素制约和影响,SDS-PAGE过程中常常出现意想不到问题,而短时间内又...
一、凝胶配置 1.分离胶的配制 电泳槽 (1)找出配套的胶板,用擦镜纸擦干净,并固定在配胶器上。随后用去离子水试漏; (2)若胶板不漏水,就进行分离胶的配制。依次将水、30%丙烯酰胺、1.5MTris-Hcl(PH 8.8)、10%SDS、10%过硫酸铵加到干净的小烧杯中,混匀(1mm的胶板,一般配一块胶用5ml。所配的胶浓度一般...
SDS-PAGE凝胶制备属于实验室最常规的操作了，刚开始做蛋白实验总是在找凝胶配制实验中所用试剂的配方，...
SDS-PAGE 凝胶快速配制试剂盒(SDS-PAGE Gel Quick Preparation Kit)包含配 SDS-PAGE 凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具,即可配制 SDS-PAGE 胶(即 SDS 聚丙烯酰胺凝胶)。本试剂盒操作步骤简单,用户只需将胶溶液与缓冲液进行 1:1 体积混合,再加入适当体积的过硫酸铵溶液,即可制得浓度为 10%的 SDS 聚丙...
SDS-PAGE凝胶的制备过程：1、 按要求装配好垂直电泳板，两块玻璃板的两侧及底部用1%的琼脂糖封边，防止封闭不严而使聚丙烯酰胺液漏出。2、 将装好的玻璃电泳板倾斜成45～60℃角。3、 按配制所需%浓度凝胶的毫升数。4、 加入TEMED后，立即混匀，缓缓倒入两玻璃板间的胶床中，直到液体接近溢出时为止。5、 立即...
SDS-PAGE凝胶配制：先配分离胶，再配浓缩胶。配制分离胶：加入TEMED后立即摇匀灌入1.5mm玻璃板；用枪吸取1ml胶沿玻璃侧壁放出，防止气泡；然后胶上加一层去离子水，凝得更快。当水和胶中间有一条折线时，说明胶已凝固(约20min)。倒去胶上的水，用蒸馏水洗涤2次，适当晾干。配制浓缩胶：加入TEMED后立即摇匀...
SDS-PAGE凝胶配制试剂盒把SDS-PAGE凝胶配制所需的Tris-HCl、Acr-Bis(29:1)、SDS等预混合成上、下层胶预混液,使用前仅需加入适量促凝成分和TEMED即可在1 h内完成下层胶(分离胶)和上层胶(浓缩胶)的配制。其中上层浓缩胶带有淡红色,点样孔清晰易辨,便于上样。极大程度上简化了凝胶制备的操作流程,降低了实验人员...